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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:聯(lián)合應(yīng)用表皮生長(zhǎng)因子酪氨酸激酶抑制劑-吉非替尼(Gefitinib)和放射線作用EGFR不同狀態(tài)的NSCLC細(xì)胞A549、H1975,觀察該藥對(duì)兩種細(xì)胞放射敏感性、DSB修復(fù)情況的影響及其EGFR是否均在X線照射后入核。
方法:1)克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞α、β和SF2等值;2)免疫熒光顯示放療后不同時(shí)間點(diǎn)各組細(xì)胞核中磷酸化g-H2AX的表達(dá),分析DSB修復(fù)情況;3)免疫印記檢測(cè)各組細(xì)胞不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞核內(nèi)外EGFR表
2、達(dá)水平。
結(jié)果:1)加藥組A549細(xì)胞SF2值為0.355低于對(duì)照組0.4443;加藥組H1975細(xì)胞和對(duì)照組SF2值分別為0.3094和0.3207,無(wú)明顯差異;2)A549細(xì)胞加藥組比對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)γ-H2AX表達(dá)明顯增高(T表示加藥組均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差,t表示對(duì)照組均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差;T30min=22.33±2.30,t30min=14.18±2.61;T45min=15.95±2.40,t45min=11.40±1.75;T
3、60min=11.47±1.19,t60min=4.40±0.58;P<0.05);H1975細(xì)胞則無(wú)差異(T30min=22.07±0.56,t30min=21.59±1.52;T45min=15.97±0.90,t45min=15.63±0.93;T60min=11.39±0.39,t60min=10.83±1.29;P>0.05);3)加藥組A549細(xì)胞比未加藥組胞漿EGFR表達(dá)明顯增加(T0min=18.1±0.306,t0mi
4、n=12.3±0.557;T15min=18.2±0.306,t15min=11.1±0.379;T30min=16.2±0.551,t30min=7.37±0.451;T60min=15.5±0.265,t60min=4.53±0.379;P<0.05),胞核內(nèi)EGFR顯著減少(T15min=0.51±0.050,t15min=4.93±0.321;T30min=1.03±0.115,t30min=5.20±0.361;T60min=
5、0.81±0.025,t60min=5.70±0.458;P<0.05);加藥組H1975細(xì)胞和未加藥組細(xì)胞照射后胞核內(nèi)沒(méi)有EGFR表達(dá),且胞漿內(nèi)EGFR表達(dá)水平兩組細(xì)胞無(wú)明顯差別(T0min=1.80±0.042,t0min=1.73±0.07;T15min=1.76±0.043,t15min=1.51±0.040;T30min=1.68±0.040,t30min=1.75±0.051;T60min=1.70±0.021,t60min
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