c-Jun氨基末端蛋白激酶(JNK)誘導(dǎo)孤兒受體TR3磷酸化的分子機(jī)理.pdf

1、c-Jun氨基末端蛋白激酶(c—Jun NH2—terminalprotein kinase，JNK)家族是促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)超家族成員之一。以JNK為中心的信號(hào)通路可被細(xì)胞因子、生長因子、應(yīng)激等多種因素激活。大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)，JNK信號(hào)通路在細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡、應(yīng)激反應(yīng)以及多種人類疾病的發(fā)生與發(fā)展中起著至關(guān)重要的作用。 核孤兒受體TR3是一種立早基因(immediate early gene)的產(chǎn)物，與固醇類激素受體

2、結(jié)構(gòu)相似，是核受體超家族的重要成員之一。TR3可被多種生長因子或凋亡誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)表達(dá)，具有復(fù)雜的生物學(xué)功能，涉及細(xì)胞增殖、分化發(fā)育和凋亡的調(diào)控過程。 我們實(shí)驗(yàn)室前期實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證明，JNK激活劑Anisomycin能誘導(dǎo)TR3磷酸化，并在構(gòu)建的一系列TR3缺失突變體(TR3△C574、TR3△N98、TR3△N50、TR3△N74、TR3△N84、TR3△N92)中推測(cè)JNK磷酸化TR3的位點(diǎn)可能在93—98氨基酸殘基之間(93—AT

3、S*PAS—98)，因?yàn)榇诵蛄兄泻蠮NK磷酸化的典型模式序列S*P。本文中，我們進(jìn)一步證實(shí)，Anisomycin通過激活JNK1(而非p38和ERK)誘導(dǎo)TR3磷酸化，該過程可以被JNK上游激酶MAPKK4和MAPKK7調(diào)控。通過構(gòu)建新的TR3點(diǎn)突變(即將TR3第95位絲氨酸突變?yōu)楸彼?，我們證實(shí)了JNK磷酸化TR3的精確位點(diǎn)位于TR3的第95位絲氨酸。進(jìn)一步研究表明，JNK磷酸化TR3與TR3泛素化密切相關(guān)。磷酸化為泛素的結(jié)合提供

4、了錨定位點(diǎn)，促進(jìn)TR3的泛素化降解。另外，JNK磷酸化抑制TR3與DNA應(yīng)答元件的結(jié)合，抑制TR3的轉(zhuǎn)錄激活能力。在HEK293T細(xì)胞中，TR3能夠促進(jìn)細(xì)胞的DNA合成，而JNK磷酸化則破壞TR3有絲分裂原的活性。 總之，我們的研究不僅第一次確定了JNK磷酸化TR3的精確位點(diǎn)，而且將磷酸化和泛素化的研究緊密結(jié)合起來，發(fā)現(xiàn)JNK通過磷酸化和泛素化調(diào)控TR3的部分信號(hào)途徑。這些研究可能為闡明JNK和TR3在某些腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)