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文檔簡介
1、目的:通過重組人胰島素樣生長因子(rhIGF-1)對體外成骨細胞增殖、骨形態(tài)蛋白-2(BMP-2)及核心結核因子(Cbfa1)基因表達的影響研究,探討rhIGF-1對骨代謝影響的可能機制。
方法:
1、大鼠成骨細胞的原代培養(yǎng)并對其進行鑒定。
2、不同濃度的rhIGF-1(0、10、50、100ng/ml)刺激體外培養(yǎng)的大鼠成骨細胞,采用噻唑藍(MTT)法測定細胞增殖能力。
3、不同
2、濃度的rhIGF-1(0、10、50、100ng/ml)刺激體外培養(yǎng)的大鼠成骨細胞,用半定量RT-PCR法檢測成骨細胞BMP-2、Cbfa1基因的表達。
4、統(tǒng)計學處理:應用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件對實驗數(shù)據(jù)進行方差分析,數(shù)據(jù)以X±S表示。方差齊,組間比較用LSD-t檢驗;方差不齊,組間比較用DunnettT3法檢驗。P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。
結果:
1、原代培養(yǎng)的細胞經(jīng)鑒定為成骨細胞。
3、
2、MTT比色法測定培養(yǎng)液OD值,結果顯示,隨著rhIGF-1濃度增高,各組OD值顯著增高,呈濃度依賴性。對照組與實驗組,實驗組組間比較,均有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
3、通過半定量RT-PCR檢測成骨細胞BMP-2和Cbfa1基因表達顯示,隨著rhIGF-1濃度增高,使成骨細胞表面BMP-2和Cbfa1基因表達升高,光密度比值明顯增加,且都呈劑量依賴性變化。對照組與實驗組,實驗組組間比較,均有顯著性統(tǒng)
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