

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、目的和意義:
移植骨髓間充質(zhì)干細胞(Mesenchymalstemcells,MSCs)治療缺血性心肌病已成為一大熱點。研究表明肌特異性miR-1在調(diào)控細胞肌分化方面起著關(guān)鍵作用。Notch信號通路參與調(diào)控眾多細胞生命過程,包括細胞增殖、凋亡和分化。有報道Notch信號通路與miRNAs之間相互作用,miRNAs調(diào)控Notch信號通路發(fā)揮生物學作用?;诖?,我們假設轉(zhuǎn)導miR-1至大鼠MSCs內(nèi)并調(diào)控Notch信號通路來促
2、進MSCs分化為心肌樣細胞,為缺血性心肌病的細胞治療提供可能。
方法:
采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法從大鼠骨髓中獲得MSCs并觀察細胞形態(tài),流式細胞學鑒定MSCs;同時合成攜帶GFP過表達miR-1慢病毒轉(zhuǎn)導系統(tǒng)(MSCsmiR-1),對照組只攜帶GFP;將過表達miR-1慢病毒系統(tǒng)轉(zhuǎn)導大鼠MSCs并培養(yǎng)15天,光鏡下觀察轉(zhuǎn)導后細胞形態(tài)變化;在第0、4、6、15天qRT-PCR檢測miR-1、心肌相關(guān)基因GATA-4
3、、α-actin、cTnI和Connexin43(Cx43)及Notch信號通路相關(guān)基因mRNA的表達變化;免疫熒光觀察cTnI和Cx43的表達;Westernblotting檢測α-actin的蛋白表達。
結(jié)果:
原代細胞呈長梭形、漩渦狀生長,流式細胞學檢測結(jié)果顯示98%以上細胞表達CD44和CD29,1%以下表達CD45;與對照組相比,MSCsmiR-1組的miR-1的含量明顯增高;轉(zhuǎn)導miR-1后,MS
4、CsmiR-1組高表達心肌相關(guān)基因:包括GATA-4、α-actin、cTnI和Cx43;轉(zhuǎn)染4天后免疫熒光即可檢測cTnI和Cx43在MSCsmiR-1組的一些細胞中表達,并在第15天時表達最強;Westernblotting更進一步證實了α-actin在MSCsmiR-1組中的表達。觀察轉(zhuǎn)導前后Notch信號通路基因的mRNA水平變化發(fā)現(xiàn),miR-1通過調(diào)控配體Jagged1來促進分化;Jagged1的mRNA水平下調(diào)負性調(diào)控MSC
5、s的肌細胞分化過程,同時我們觀察到了Notch1、Notch3和Hey2的mRNA水平下調(diào),這說明,miR-1促進的肌分化過程伴隨著Notch信號通路的Jagged1-Notch1/Notch3-Hey2mRNA水平的顯著下調(diào)Jagged1-Notch1/Notch3-Hey2是肌分化過程中Notch信號通路的關(guān)鍵因子,這也許可以用來調(diào)控干細胞命運。
結(jié)論:
轉(zhuǎn)導miR-1至大鼠MSCs中可促使其向心肌樣細胞
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- mir-1下調(diào)Dll-1-Hes-1-Notch信號調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞分化.pdf
- TCF1介導的Wnt-β-catenin信號通路促進小鼠胚胎干細胞向心肌細胞分化.pdf
- Shh信號通路調(diào)控大鼠MSCs分化為神經(jīng)細胞機制的研究.pdf
- 模擬心肌微環(huán)境中BMP-2誘導大鼠BM-MSCs向心肌樣細胞分化的實驗研究.pdf
- microRNA-1調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞分化的實驗研究.pdf
- 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞的體外誘導分化研究.pdf
- 誘導骨髓干細胞向心肌樣細胞分化的研究.pdf
- MicroRNA-1調(diào)控脂肪間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞分化的分子機制研究.pdf
- mTOR信號通路通過Notch信號調(diào)節(jié)細胞分化.pdf
- Jagged1介導的Notch信號通路激活誘導大鼠肝移植術(shù)后膽管上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)變的研究.pdf
- 人羊膜細胞具有向心肌樣細胞分化的特性.pdf
- PPARγ對骨髓MSC向心肌樣細胞分化的影響及調(diào)控作用的研究.pdf
- Nulp1通過Wnt信號通路調(diào)控P19細胞向心肌細胞分化的分子機制研究.pdf
- Notch1信號通路在大鼠、成人乳腺上皮干細胞分化中的作用.pdf
- miR-1對軟骨細胞增殖分化的影響.pdf
- Wnt信號通路介導的基因調(diào)控毛囊干細胞定向分化的研究.pdf
- Smad信號通路調(diào)控BMP9介導的iSCAP成骨-成牙本質(zhì)分化的機制研究.pdf
- AS、GS和PNS誘導MSCs分化為心肌樣細胞的研究.pdf
- Shox2介導HCN4基因修飾犬MSCs定向分化心臟起搏樣細胞的實驗研究.pdf
- 轉(zhuǎn)錄因子RBP-J通過介導Notch信號調(diào)控神經(jīng)細胞分化.pdf
評論
0/150
提交評論