RNA干擾抑制Survivin基因?qū)κ笄傲邢侔┮浦擦錾L的影響.pdf

1、目的：研究采用RNA干擾抑制前列腺癌Pc-3m細(xì)胞株中survivin基因的表達(dá)，對鼠前列腺癌移植瘤生長的影響。 材料和方法：應(yīng)用前列腺癌PC-3m細(xì)胞體外培養(yǎng)，接種于裸鼠右季肋皮下致瘤，14天后隨機(jī)分為三組：空白對照組、陰性對照組和實(shí)驗組。利用已經(jīng)成功構(gòu)建的負(fù)載雙片段survivin shRNA的腺病毒載體進(jìn)行實(shí)驗組瘤內(nèi)多點(diǎn)注射，每兩天一次，共5次。觀察腫瘤的體積變化和腫瘤體積生長變化的時間曲線。30天后處死各組取腫瘤組織秤重

2、、計算抑瘤率。免疫組織化學(xué)染色方法觀察各組移植瘤組織中的Survivin蛋白表達(dá)變化，透射電鏡觀察前列腺癌細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果：常規(guī)病理證實(shí)前列腺癌動物模型成功建立。觀察30天后最終空白對照組、陰性對照組和實(shí)驗組分別體積為1504±24.58 mm<'3>、1578±23.08mm<'3>和670.4±15.82mm<'3>，平均瘤重為2.20±0.27g、2.10±0.23g和0.89±0.20g，陰性組和實(shí)驗組的抑瘤率

3、為4.5％和59.5％，免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示Survivin蛋白表達(dá)各組分別為71.03±8.2％，69.13±9.4％和45.37±11.6％，實(shí)驗組和兩對照組相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，空白對照組和陰性對照組比較差異無顯著性差異。腫瘤的生長曲線提示生長受到了明顯抑制。透射電鏡觀察到實(shí)驗組細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)發(fā)生變化表現(xiàn)為；細(xì)胞體積變小，細(xì)胞質(zhì)濃縮，胞內(nèi)出現(xiàn)空泡，細(xì)胞核染色質(zhì)固縮，核碎裂、邊集，致密染色質(zhì)塊聚集于核膜下，一些細(xì)胞器如線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)