miR-196a2 rs11614913單核苷酸多態(tài)性在胃癌遺傳易感性、預(yù)后以及化療敏感性中的作用探討.pdf

1、胃癌(gastric cancer，GC)是最常見的惡性消化系統(tǒng)腫瘤之一，在世界范圍內(nèi)，每年正以將近100萬(wàn)新發(fā)病例的速度增長(zhǎng)，在全球惡性腫瘤的發(fā)病率中位于第四位，據(jù)世界衛(wèi)生組織(WTO)統(tǒng)計(jì)，每年大約有70多萬(wàn)人死于胃癌或者胃癌相關(guān)疾病，居常見腫瘤死因的第二位。根據(jù)地理位置劃分，胃癌主要發(fā)生于亞洲、非洲以及南美洲等發(fā)展中國(guó)家。以亞洲國(guó)家為例，中日韓三個(gè)國(guó)家，每年的新發(fā)胃癌病例數(shù)大約占全球胃癌總發(fā)病數(shù)的2/3多。其中，我國(guó)作為世界上人口

2、最多的國(guó)家，每年新發(fā)胃癌病例數(shù)大約占全球胃癌總數(shù)的1/2，是僅低于肺癌的第二大致死性惡性腫瘤。雖然近年來(lái)隨著手術(shù)方法的改進(jìn)以及放化療等技術(shù)手段的應(yīng)用，胃癌的死亡率有一定程度的下降，但是胃癌的五年生存率仍然偏低。大量的流行病學(xué)已經(jīng)證實(shí)，胃癌的發(fā)生是多因素、多階段、多基因共同作用的復(fù)雜疾病，越來(lái)越多的研究也表明，環(huán)境暴露因素、遺傳因素對(duì)胃癌的發(fā)生發(fā)展以及預(yù)后和化療敏感性都起到至關(guān)重要的作用。處于相同環(huán)境暴露的不同個(gè)體往往只有一小部分人罹患胃

3、癌，且患病后其預(yù)后及對(duì)化療的敏感性也有顯著的不同，這些結(jié)果都提示我們?nèi)巳簩?duì)胃癌可能存在個(gè)體易感性及預(yù)后的差異。
　　隨著人類基因組計(jì)劃的進(jìn)行，大量的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)基因關(guān)鍵位置的遺傳變異將會(huì)對(duì)基因的結(jié)構(gòu)、表達(dá)以及分子調(diào)控功能產(chǎn)生重要的影響，進(jìn)一步導(dǎo)致機(jī)體部分生物學(xué)調(diào)控功能的改變。單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms，SNPs)是最常見的基因遺傳變異。大量研究結(jié)果表明，基因遺傳變異（geneti

4、c variation）決定了個(gè)體罹患腫瘤的遺傳易感性，SNPs能夠通過(guò)改變基因結(jié)構(gòu)或表達(dá)量，從而影響基因?qū)C(jī)體的調(diào)控作用。藥物化療是胃癌抗腫瘤治療的重要手段，氟尿嘧啶類和鉑類藥物是胃癌化療的常規(guī)用藥，但相同藥物對(duì)不同患者往往產(chǎn)生不同的療效，這些現(xiàn)象提示不同個(gè)體對(duì)腫瘤化療藥物的療效也不盡相同，其中化療相關(guān)的基因多態(tài)性也許發(fā)揮重要作用。
　　MiRNAs(microRNAs，微小RNA)主要是指一類長(zhǎng)度為18～23個(gè)核苷酸的進(jìn)化上保

5、守的非編碼小RNA分子。它們可參與包括細(xì)胞增殖、細(xì)胞發(fā)育、分化、凋亡及腫瘤的發(fā)生發(fā)展，行使多種重要的生物學(xué)功能。許多研究已經(jīng)表明，單個(gè)或多個(gè)SNPs間的聯(lián)合效應(yīng)與腫瘤發(fā)生發(fā)展及預(yù)后顯著相關(guān)，并且可能存在重要的基因-基因、環(huán)境-基因交互作用。但其確切的機(jī)制并未完全闡明。早在2008年，Hu等人發(fā)現(xiàn)位于miR-196a2上的rs11614913位點(diǎn)可以影響miRNA從pre-miRNA到成熟miRNA的過(guò)程，同時(shí)證實(shí)該位點(diǎn)與肺癌的發(fā)生發(fā)展密

6、切相關(guān)。但是miR-196a2上的rs11614913基因遺傳變異在胃癌中的研究甚少。近來(lái)的研究表明，異常表達(dá)的miRNAs與胃癌的發(fā)生發(fā)展都具有密切的聯(lián)系:當(dāng)pri-miRNAs(primary miRNAs，初級(jí)miRNAs)上存在重要的功能學(xué)SNPs，可能會(huì)影響pre-miRNAs(precursor miRNAs，前體miRNAs)的生成過(guò)程，進(jìn)而導(dǎo)致成熟miRNAs的結(jié)構(gòu)或者表達(dá)水平異常;成熟的miRNAs生成過(guò)程需要多個(gè)關(guān)鍵

7、調(diào)控基因的參與（如DICER、DROSHA等基因）。如我們所知，miRNAs發(fā)揮調(diào)控作用是通過(guò)與基因3'UTR(3'untranslate region，非翻譯區(qū))結(jié)合引起靶基因mRNA降解或抑制其翻譯，進(jìn)而參與胃癌的發(fā)生發(fā)展。因此，當(dāng)SNPs位于成熟miRNAs上，可直接影響miRNAs對(duì)靶基因的調(diào)控作用，進(jìn)一步可能導(dǎo)致胃癌的發(fā)生，以及預(yù)后和對(duì)藥物敏感性的差異。
　　雖然已有研究發(fā)現(xiàn)miR-196a2 rs11614913與許多

8、腫瘤的易感性顯著關(guān)聯(lián)，但是其與胃癌的遺傳易感性還有待探討。本研究擬通過(guò)系統(tǒng)探討miR-196a2上的rs11614913位點(diǎn)遺傳變異在胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)中的作用及其對(duì)胃癌患者預(yù)后的影響，并且探討其與胃癌患者化療敏感性的關(guān)系。為以后的臨床醫(yī)療實(shí)踐提供理論依據(jù)。
　　本文主要從以下幾個(gè)方面進(jìn)行了論述：
　　第一部分 miR-196a2 rs11614913基因遺傳變異與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)聯(lián)性研究
　　近年來(lái)，隨著miRNAs逐漸為

9、人們所了解，其在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用逐漸被揭示出來(lái)。本研究旨在通過(guò)分子流行病學(xué)病例-對(duì)照研究探討其可能的生物學(xué)關(guān)聯(lián)。MIR196a2 rs11614913(T＞C)的多態(tài)性已被報(bào)道與各種癌癥的發(fā)展和進(jìn)展有關(guān)。在本項(xiàng)研究中，目的是探索MIR196a2 rs11614913多態(tài)性與胃癌中國(guó)人群的遺傳易感性的關(guān)聯(lián)。
　　本研究采用包括1689例胃癌病例與1946例健康對(duì)照的兩階段分子流行病學(xué)病例-對(duì)照研究方法分析候選SNPs與胃

10、癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)性，其中一階段研究包括749例病例和900例對(duì)照，二階段研究中包括940例病例和1046例對(duì)照。結(jié)果發(fā)現(xiàn)單核苷酸變異rs11614913 CC無(wú)論是發(fā)現(xiàn)隊(duì)列還是驗(yàn)證隊(duì)列相對(duì)于CT/TT基因型都能顯著降低中國(guó)人群罹患胃癌的風(fēng)險(xiǎn)(發(fā)現(xiàn)隊(duì)列:調(diào)整的odds ratio(OR)=0.78，95％confidence interval(CI)=0.62-0.99;驗(yàn)證隊(duì)列0.64，0.52-0.80）。
　　研究結(jié)果證明

11、miR-196a2 rs11614913與中國(guó)人群的胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)，其也許是一個(gè)重要的胃癌易感生物標(biāo)志物，對(duì)于提高胃癌的早診早治具有重要的意義。
　　第二部分 miR-196a2rs11614913基因遺傳變異與胃癌預(yù)后及化療敏感性的關(guān)聯(lián)性研究
　　在本項(xiàng)研究的第一部分，發(fā)現(xiàn)miR-196a2 rs11614913遺傳多態(tài)性與胃癌的易感性顯著相關(guān)，但是其與胃癌患者的術(shù)后生存及化療敏感性是否存在著關(guān)聯(lián)還有待大樣本人群的進(jìn)

12、一步驗(yàn)證。
　　本部分研究采用回顧性的隊(duì)列研究設(shè)計(jì)，探討miR-196a2 rs11614913與胃癌預(yù)后及化療敏感性之間的關(guān)系。本研究回顧收集江蘇省宜興市人民醫(yī)院及宜興市腫瘤醫(yī)院就診和接受手術(shù)治療的新發(fā)胃癌患者，均經(jīng)組織病理學(xué)確診，無(wú)性別、年齡及病理類型的限制，共收集病例1022例。隨訪五年后，共有940例樣本可以納入研究，進(jìn)行下一步的臨床研究。發(fā)現(xiàn)攜帶CC基因型的個(gè)體相比于CT/TT的患者有一個(gè)更好的預(yù)后(HR=0.72，95

13、％ CI=0.55-0.95)，并且相對(duì)于賁門癌患者，攜帶CC基因型的非賁門癌個(gè)體有更好的預(yù)后(非賁門癌:HR=0.57，95％ CI=0.40-0.83;賁門癌:HR=1.00，95％ CI=0.65-1.53)。但是，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)miR-196a2 rs11614913與胃癌化療敏感性之間的關(guān)系。
　　本項(xiàng)研究提示miR-196a2 rs11614913也許是一個(gè)預(yù)測(cè)胃癌患者預(yù)后的敏感指標(biāo)，但是其與胃癌化療敏感性之間的關(guān)系有待大樣