透明質(zhì)酸復(fù)合BMP-2轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)干細胞修復(fù)骨缺損.pdf

1、研究背景骨缺損的修復(fù)是臨床醫(yī)學(xué)亟待解決的重要課題.近年來隨著組織工程科學(xué)的迅速發(fā)展,使骨缺損的修復(fù)成為可能.理想的組織工程化骨的構(gòu)建應(yīng)具備三個要素:原始的骨祖細胞、足量的骨誘導(dǎo)因子、骨傳導(dǎo)性物質(zhì).用基因工程及組織工程相結(jié)合方法構(gòu)建的人工骨,具備以上三個要素,是修復(fù)骨缺損的理想方法.目的評價透明質(zhì)酸(HA)復(fù)合腺病毒介導(dǎo)的人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2基因(Adv-hBMP-2)轉(zhuǎn)染的兔骨髓基質(zhì)干細胞(BMSCs)的體外及裸鼠肌內(nèi)誘導(dǎo)成骨和成軟骨活

2、性;評價HA復(fù)合Adv-hBMP-2轉(zhuǎn)染的BMSCs構(gòu)建的組織工程化骨對兔橈骨干缺損的修復(fù)效果.方法(1)體外成骨活性研究:抽取兔骨髓行BMSCs培養(yǎng),分成4組:Adv-hBMP-2轉(zhuǎn)染細胞+HA組、Adv-hBMP-2轉(zhuǎn)染細胞組、未轉(zhuǎn)染細胞+HA組和未轉(zhuǎn)染細胞組,檢測方法包括:免疫沉淀法(IP)加Western印跡法檢測hBMP-2表達、RT-PCR法檢測骨涎蛋白mRNA表達、ALP和vonKossa染色及ALP定量檢測;(2)裸鼠肌

3、內(nèi)誘導(dǎo)成骨試驗:裸鼠12只(共24側(cè))分4組:注射Adv-hBMP-2轉(zhuǎn)染細胞+HA組(n=8)、注射Adv-hBMP-2轉(zhuǎn)染細胞組(n=8)、注射未轉(zhuǎn)染細胞組(n=4)和單純注射HA組(n=4),觀察方法:X線觀察、成骨計量對照、組織學(xué)檢查;(3)組織工程化骨修復(fù)兔橈骨干缺損(1.5cm)的研究:20只兔(40側(cè))分4組:注射Adv-hBMP-2轉(zhuǎn)染細胞+HA組(n=10)、注射Adv-hBMP-2轉(zhuǎn)染細胞組(n=10)、單純注射HA