毛冬青總皂苷、總黃酮對大、小鼠血瘀合并腦缺血耐受動物模型的影響.pdf

1、　　目的：建立大、小鼠血瘀合并腦缺血耐受動物模型,觀察毛冬青總皂苷和毛冬青總黃酮對血瘀合并腦缺血耐受動物模型的影響,探討毛冬青總皂苷和毛冬青總黃酮的活血化瘀作用及提高血瘀合并腦缺血耐受動物模型的腦保護(hù)作用。
　　方法：1.采用地塞米松0.8mg/kg后腿肌肉注射15d造成小鼠血瘀模型,同時給予相應(yīng)藥物。采用兩次阻斷雙側(cè)頸總動脈血流的方法,建立小鼠腦缺血耐受模型,第一次手術(shù)后,華佗再造丸組與尼莫地平組,毛冬青總皂苷和總黃酮大、中

2、、小劑量組分別給予相應(yīng)的藥物灌胃,假手術(shù)組、預(yù)處理模型組與缺血再灌注組同時給予同體積生理鹽水灌胃,每日1次,連續(xù)給藥5d。于第二次手術(shù)后24h,測定全血粘度、ATP酶(ATPase)活力、一氧化氮合酶(NOS)活力、谷氨酸(Glu)濃度,HE染色觀察腦組織形態(tài)學(xué)變化。
　　2.采用地塞米松0.2mg/kg后腿肌肉注射10d造成大鼠血瘀模型,同時給予相應(yīng)藥物。采用阻斷雙側(cè)頸總動脈血流,再采用線栓法阻塞左側(cè)大腦中動脈,建立大鼠全腦

3、-局灶腦缺血耐受模型。第一次手術(shù)后,金納多組與毛冬青總皂苷和黃酮大、中、小劑量組分別給予相應(yīng)的藥物灌胃,假手術(shù)組、預(yù)處理模型組與缺血再灌注組同時給予同體積生理鹽水灌胃,每日 1次,連續(xù)給藥4d。于第二次手術(shù)后24h,測定大鼠的全血黏度和血漿黏度以及腦組織中 ATPase、超氧化物歧化酶(SOD)活性,通過蛋白調(diào)往調(diào)亡蛋白 Bax、抗凋亡蛋白 Bcl-2 免疫組化染色和HE染色,觀察腦組織形態(tài)學(xué)變化。
　　結(jié)果：1.對血瘀合并腦

4、缺血耐受小鼠模型的影響：小鼠血瘀合并腦缺血耐受模型復(fù)制成功,預(yù)處理模型組及缺血再灌注組動物全血粘度明顯升高、ATPase活性降低、Glu濃度和NOS活性增加；與缺血再灌注組動物相比,預(yù)處理模型組動物全血流變值升高,腦組織中 NOS活性降低,谷氨酸(Glu)生成減少,ATP酶(ATPase)活力增強(qiáng),且動物腦組織的病理損傷程度明顯減輕。與模型組比較,毛冬青總皂苷和毛冬青總黃酮能顯著或明顯改善血瘀小鼠的全血粘度,增強(qiáng)ATPase 活力,減少

5、 Glu 的生成,降低 NOS 的活力,對腦神經(jīng)細(xì)胞損傷有明顯的保護(hù)作用,與毛冬青總皂苷比較,毛冬青總黃酮對腦細(xì)胞的保護(hù)作用更明顯。
　　2.對血瘀合并腦缺血耐受大鼠模型的影響：大鼠血瘀合并腦缺血耐受模型復(fù)制成功,模型組動物及缺血再灌注全血粘度明顯升高、ATPase活性降低、T-SOD活力顯著下降、Bax 陽性細(xì)胞表達(dá)顯著增加；與缺血損傷組比較,缺血耐受組動物全血流變值升高,超氧化物歧化酶(SOD)、ATP 酶(ATPase)

6、活力增強(qiáng),動物腦組織的病理損傷程度明顯減輕。與模型組比較,毛冬青總皂苷和毛冬青總黃酮能明顯或顯著改善血瘀大鼠的全血粘度,顯著或明顯增強(qiáng)ATPase、T-SOD活力和 Bcl-2 陽性細(xì)胞的表達(dá),對腦神經(jīng)細(xì)胞的損傷有明顯的保護(hù)作用,與毛冬青總皂苷比較,毛冬青總黃酮對腦細(xì)胞的保護(hù)作用更明顯。
　　結(jié)論：缺血預(yù)處理可誘導(dǎo)腦缺血耐受作用,抑制NOS的活性和Glu的過量表達(dá),增強(qiáng)腦細(xì)胞的抗氧化性及能量代謝,以及增強(qiáng) Bcl-2表達(dá),降低