小薊總黃酮對(duì)大、小鼠糖尿病模型的影響.pdf

1、目的：通過(guò)建立大、小鼠糖尿病模型來(lái)研究小薊總黃酮提取物對(duì)大、小鼠糖尿病模型的治療作用，并通過(guò)測(cè)定糖代謝指標(biāo)、脂代謝指標(biāo)、氧化應(yīng)激指標(biāo)等相關(guān)指標(biāo)和觀察胰臟組織的病理學(xué)形態(tài)學(xué)變化，初步探討小薊總黃酮提取物對(duì)大、小鼠糖尿病模型的治療作用及作用特點(diǎn)。
　　方法：采用腹腔注射四氧嘧啶的方法建立小鼠高血糖模型。購(gòu)進(jìn)動(dòng)物，正常喂養(yǎng)3天，隨機(jī)取12只作為空白組。其余根據(jù)體重，腹腔注射四氧嘧啶（5％，200mg/kg），72小時(shí)后，眼內(nèi)眥靜脈叢取血

2、，測(cè)血糖值，篩選出血糖值大于11.1mmol/L的小鼠，根據(jù)血糖值隨機(jī)均勻分為模型、二甲雙胍混懸液、小薊總黃酮混懸液高、中、低劑量5組。每組12只。分別灌服相應(yīng)藥物，空白組和模型組灌服相同體積0.1%（羧甲基纖維素）CMC，連續(xù)給藥7天，于最后一次給藥前12小時(shí)禁食不禁水，最后一次給藥后兩小時(shí)去眼球取血，測(cè)血糖；稱取80mg肝臟，測(cè)肝糖原；取胰臟做病理切片。
　　采用尾靜脈注射鏈脲佐菌素（STZ）的方法建立小鼠糖尿病模型。購(gòu)進(jìn)動(dòng)物

3、,正常喂養(yǎng)3天，隨機(jī)取12只作為空白組。其余根據(jù)體重，尾靜脈注射10mg/mL STZ溶液（PH為4.2的檸檬酸緩沖液配制，80mg/kg）,7日后眼眶靜脈取血，測(cè)血清血糖值，選取血糖值在16.7mg/L-21.0mmol/L，并明顯有多飲多食多尿癥狀的小鼠，根據(jù)血糖值均勻分成5組，二甲雙胍混懸液組、小薊總黃酮高、中、低劑量混懸液組，模型組。每天用給予相應(yīng)藥物灌胃給藥，空白組和模型組用同體積0.1%CMC灌胃，每日1次，連續(xù)給藥30天，

4、在給藥的第10、20、30天禁食12小時(shí)后測(cè)血糖值，第31天禁食后12h，灌胃給藥，2h后，眼眶取血，分離血清，測(cè)血清中甘油三酯、總膽固醇、胰島素、糖基化血清蛋白、活性氧簇的含量，稱取80mg肝臟，測(cè)肝糖原含量；取胰腺、肝臟甲醛固定，做組織病理切片，觀察病理組織變化。
　　采用尾靜脈注射鏈脲佐菌素（STZ）的方法建立大鼠糖尿病模型。購(gòu)進(jìn)的動(dòng)物正常喂養(yǎng)3天，隨機(jī)取14只作為空白組。其余根據(jù)體重，尾靜脈注射10mg/mLSTZ溶液（P

5、H為4.2的檸檬酸緩沖液配制，40mg/kg）7天后尾靜脈取血，測(cè)血清血糖值，選取血糖值在16.7mg/L-21.0mmol/L，并明顯具有多飲多食多尿癥狀的大鼠，根據(jù)血糖值均勻分為5組，分別為二甲雙胍混懸液組、小薊總黃酮高、中、低劑量混懸液組，模型組。并給予相應(yīng)藥物灌胃，空白組和模型組給予同體積0.1%CMC灌胃，每日1次連續(xù)給藥30天。分別在給藥的第10、20、30天禁食12h后尾靜脈采血，分離血清，測(cè)血糖值，在第31天禁食后12h

6、，灌胃2h后取血，分離血清，測(cè)血清中總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、甘油三酯、一氧化氮、糖基化血紅蛋白、B細(xì)胞淋巴瘤因子2（Bcl-2）、Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）、活性氧（ROS）、胰島素受體、丙二醛、谷胱甘肽過(guò)氧化氫酶的含量；取胰腺、肝臟甲醛固定，做組織病理切片，觀察病理組織變化。結(jié)果：采用腹腔注射四氧嘧啶的方法造成小鼠高血糖模型。與模型組相比，二甲雙胍和小薊總黃酮可以降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠模型的血糖值（P

7、<0.05），增加肝糖原的含量（P<0.01），抑制糖異生，維持血糖水平穩(wěn)定，改善胰腺的病理變化。
　　采用尾靜脈注射 STZ的方法造成小鼠糖尿病模型。與模型組相比，小薊總黃酮可降低 STZ所致小鼠模型的10天以后血糖值（P<0.05），降低糖化血清蛋白含量（P<0.05），降低總膽固醇（P<0.01）的含量、降低甘油三酯的含量（P<0.05）、降低活性氧簇活力（P<0.01），升高肝糖原含量（P<0.05），升高胰島素含量（P<

8、0.01），改善胰腺、肝臟的病理變化。
　　采用尾靜脈注射 STZ造成大鼠糖尿病模型。與模型組相比，小薊總黃酮可降低 STZ所致大鼠糖尿病模型的10天以后的血糖值（P<0.05），降低糖化血清蛋白含量（P<0.01），升高胰島素分泌水平（P<0.01），降低胰島素抗體水平（P<0.01），降低甘油三酯、總膽固醇含量（P<0.01），降低低密度脂蛋白（P<0.05），升高高密度脂蛋白（P<0.01），增加血清超氧化物歧化酶（SOD）

9、酶活力（P<0.01），一氧化氮合酶（NOS）水平（P<0.05），降低一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）的水平（P<0.01），提高過(guò)氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過(guò)氧化氫酶、SOD活力（P<0.01），降低 Bcl-2相關(guān) X蛋白（BAX）的含量（P<0.01），B淋巴細(xì)胞瘤因子2含量升高（P<0.01），降低 H2O2含量，降低活性氧（ROS）的活力（P<0.01）；降低表達(dá)細(xì)胞色素 C的mRNA含量（P<0.05），改善胰腺、肝臟

10、的病理變化。
　　結(jié)論：小薊總黃酮提取物對(duì)大、小鼠糖尿病模型有很好的保護(hù)作用。小薊總黃酮提取物可降低血糖、糖化血清蛋白水平，降低甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白含量，升高肝糖原含量，從而改善機(jī)體的脂代謝紊亂；促進(jìn)胰島素分泌和肝糖原的合成，增加 GSH-PX、H2O2含量，增強(qiáng) SOD的活性，降低 ROS水平，降低 NO、CAT含量，降低 NOS活力，升高Bcl-2含量，降低 BAX含量，降低血清中MDA水平，降低表達(dá)細(xì)