系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清MMP-3、MMP-9及TIMP-1的檢測和意義.pdf

1、基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)是一組在結(jié)構(gòu)上具有極大的同源性,能降解細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)蛋白的內(nèi)肽酶總稱,因含有金屬離子鋅鈣而得名.金屬蛋白酶組織抑制劑(tissue inhibitor of matrixmetalloproteinases,TIMP)是MMP內(nèi)源性特異性抑制因子,TIMP以1∶1的比例與MMP形成MMP-TIMP復(fù)合物,阻斷MMP

2、與底物的結(jié)合,也可與酶原結(jié)合阻止其活化.MMP-TIMP是參與ECM降解與重建的主要蛋白酶系統(tǒng),它參與了機(jī)體多種生理及病理過程,包括組織的修復(fù)與重建、細(xì)胞的遷移、血管的形成、炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答以及腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移.基質(zhì)金屬蛋白酶.3(matrixmetalloproteinase-3,MMP-3)及基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)是基質(zhì)金屬蛋白酶家族的重要成員,MMP-3又稱基質(zhì)溶解

3、素-1(stromelysin-1),主要降解蛋白聚糖的核心蛋白、纖維連接蛋白、彈性蛋白、層粘蛋白、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ型膠原等.MMP-9又稱明膠酶B(gelatinase B),主要降解Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅺ型膠原、明膠、纖維連接蛋白、彈性蛋白、層粘蛋白、粘連蛋白等.TIMP-1是MMP-3及MMP-9的主要抑制劑. 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種病因未明的自身免疫性炎癥性

4、結(jié)締組織病,表現(xiàn)為體內(nèi)產(chǎn)生大量的自身抗體,受累臟器出現(xiàn)免疫復(fù)合物沉積及各種白細(xì)胞浸潤,引起一系列炎癥反應(yīng),并最終導(dǎo)致多系統(tǒng)多臟器損害.在SLE發(fā)病機(jī)制中炎癥細(xì)胞浸潤、血管炎性損害、細(xì)胞外基質(zhì)代謝紊亂與異常沉積是重要環(huán)節(jié),推測MMP-3、MMP-9及TIMP-1在SLE的病理生理中發(fā)揮作用.目前在SLE血清MMP-3及MMP-9水平的報道較少見,為進(jìn)一步了解MMP-3、MMP-9及TIMP-1在SLE發(fā)病機(jī)制中的作用,我們檢測了45例SL

5、E患者血清MMP-3、MMP-9及TIMP-1水平,并探討其臨床意義. 材料和方法 1.研究對象 共搜集鄭州大學(xué)一附院皮膚科門診及病房資料完整的SLE患者45例,均符合1997年美國風(fēng)濕協(xié)會修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn),其中女41例,男4例;年齡9-64歲,平均年齡(28.41±11.32)歲,病程2天-12年,平均(31.7±46.8)月,其中10例SLE活動組患者經(jīng)正規(guī)皮質(zhì)類固醇激素治療(劑量相當(dāng)于潑尼松30-80m

6、g/d),病情穩(wěn)定一個月后再次留取血清標(biāo)本.正常對照組30例為健康體檢者,其中女27例,男3例,年齡20-43歲,平均(26.95±10.63)歲,兩組在性別及年齡構(gòu)成上差異無顯著性. 根據(jù)SLE疾病活動指數(shù)(SLEDAI)對SLE患者疾病活動程度進(jìn)行評分,參照鄭敏等標(biāo)準(zhǔn)判斷是否為疾病活動期.根據(jù)尿蛋白(++以上或>O.5g/d或尿有顆粒管型)將SLE分為腎損害組及非腎損害組. 2.實驗方法 血清MMP-3、MM

7、P-9及TIMP-1的檢測:MMP-3、MMP-9及TIMP-1試劑盒購自上海森雄科技實業(yè)有限工司(CatalogNo:SX01105;SX01108;SX01148),采取雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA),嚴(yán)格按照說明書步驟進(jìn)行操作. 3.統(tǒng)計方法 所有數(shù)據(jù)均用SPSS11.0統(tǒng)計軟件處理,血清MMP-3、MMP-9及TIMP-1含量均為偏態(tài)計量資料,用中位數(shù)及四分位數(shù)(25﹪,75﹪)表示,組問比較采用Ma

8、nn-Whitney U檢驗,治療前后采用Wilcoxon檢驗,相關(guān)分析采用Spearman相關(guān)分析方法,顯著性水平α=O.05. 一、SLE患者組與正常對照組血清MMP-3、MMP-9及TIMP-1水平比較及相關(guān)性分析 1.SLE患者血清MMP-3水平明顯升高(p<0.01),MMP-9水平明顯降低(P<0.01),TIMP-1水平兩組差異無顯著性(p＞0.05). 2.相關(guān)性分析表明,SLE患者組血清MMP-

9、3、MMP-9分別與TIMP-1無明顯相關(guān)性(r分別為-0.065;0.117 P>0.05),MMP.3與MMP-9呈負(fù)相關(guān)(r=0.687P<0.01),正常對照組MMP-3、MMP.9分別與TIMP-1無明顯相關(guān)性(r分別為-0.092;0.436 P>0.05),MMP-3與MMP-9無明顯相關(guān)性(r=0.196 P>0.05). 二、血清MMP-3、MMP-9、TIMP-1與SLE疾病活動性的關(guān)系及相關(guān)性分析

10、1.SLE活動期患者血清MMP-3水平明顯高于非活動期(p＜0.05),MMP-9明顯低于非活動期(P<0.05),TIMP-1水平活動組與非活動組比較差異無顯著性(P>0.05). 2.相關(guān)性分析顯示,SLE患者血清MMP-3水平與SLEDAI呈正相關(guān)(r=0.845P<0.01),MMP-9與SLEDAI呈負(fù)相關(guān)(r=0.676 P<0.01),TIMP-1與SLEDAI無明顯相關(guān)性(r=0.098 P>0:05).

11、 三、不同臨床特點(diǎn)SLE患者血清MMP-3、MMP-9、TIMP-1水平比較腎損害組及肺炎組血清MMP-3水平高于非腎損害組及非肺炎組(P<0.01),而血清MMP-9明顯低于非腎損害組及非肺炎組(p<0.01),血清MMP-3、MMP-9水平在關(guān)節(jié)炎組與非關(guān)節(jié)炎組、蝶形紅斑組與非蝶性紅斑組之間比較差異無顯著性(p＞0.05),TIMP-1水平在腎損害組與非腎損害組、肺炎組與非肺炎組、關(guān)節(jié)炎組與非關(guān)節(jié)炎組、蝶形紅斑組與非蝶形紅斑組之間比

12、較差異無顯著性(p>0.05). 四、SLE患者血清MMP-3、MMP-9、TIMP-1水平與免疫學(xué)指標(biāo)的關(guān)系 1.血清MMP-3水平抗dsDNA陽性組高于dsDNA陰性組(P<0.05),低補(bǔ)體C3組高于非低補(bǔ)體C3組(p＜0.05),而在ANA陽性組與陰性組、抗Sm陽性組與陰性組、抗SSA陽性組與陰性組、抗SSB陽性組與陰性組、抗RNP陽性組與陰性組、高IgG組與非高IgG組之間比較差異無顯著性(p<0.05).

13、 2.血清MMP-9水平在抗dsDNA陽性組與陰性組、ANA陽性與陰性組、抗Sm陽性組與陰性組、抗SSA陽性組與陰性組、抗SSB陽性組與陰性組、抗RNP陽性組與陰性組、高IgG組與非高IgG組之間比較差異無顯著性(P>0.05),而在低補(bǔ)體C3組MMP-9水平低于非低補(bǔ)體C3組(P<0.05). 3.血清TIMP-1水平在抗dsDNA陽性組與陰性組、ANA陽性與陰性組、抗SSB陽性與陰性組、低補(bǔ)體C3與非低補(bǔ)體C3組、高Ig

14、G組與非高IgG組之間比較差異無顯著性(P>0.05),而在抗Sm陽性組、抗SSA陽性組TIMP-1水平高于抗Sm陰性組及抗SSA陰性組(P<0.05),抗RNP陽性組低于抗RNP陰性組(P<0.05). 五、某些血液學(xué)指標(biāo)與血清MMP-3、MMP-9、TIMP-1水平的關(guān)系及相關(guān)性分析 1.外周血白細(xì)胞(WBC)降低者和血清白蛋白(ALB)降低者血清MMP-3水平高于無上述表現(xiàn)者(P<0.05),而MMP-9水平低于無

15、上述表現(xiàn)者(P<0.05),在血沉(ESR)增高組與正常組血清MMP-3及MMP-9水平差異無顯著性(P>0.05);血清TIMP-1水平在以上各組之間差異均無顯著性(P>0.05). 2.相關(guān)性分析表明,血清MMP-3與WBC呈負(fù)相關(guān)(r=-0.725 P<0.01),與ESR呈正相關(guān)(r=0.894 P<0.01),與ALB無明顯相關(guān)性(r=0.126 P>0.05):血清MMP-9與WBC呈正相關(guān)(r=0.636 P<0.

16、01),與ESR呈負(fù)相關(guān)(r=0.619P<0.01),與ALB無明顯相關(guān)性(r=-0.270 P>0.05);血清TIMP-1水平與WBC、ESR、ALB水平均未見明顯相關(guān)性(r分別為0.062;0.046;0.030 P均>0.05). 六、10例患者治療前后血清MMP-3、MMP-9、TIMP-1水平的比較經(jīng)類固醇激素治療后SLE患者血清MMP-3水平下降(P<0.01),MMP-9水平升高(P<0.01),而TIMP-1

17、水平治療前后無明顯變化(P>0.05). 結(jié)論 一、血清MMP-3在SLE患者組高于正常對照組,活動組高于非活動組,腎損害組高于非腎損害組,肺炎組高于非肺炎組說明MMP-3參于SLE的發(fā)病機(jī)制. 二、血清MMP-9水平在SLE患者組低于正常對照組,活動組低于非活動組,腎損害組低于非腎損害組,肺炎組低于非肺炎組說明MMP-9同樣參于SLE的發(fā)病機(jī)制. 三、血清MMP-3、MMP-9水平可以作為SLE疾病活動