曲尼司特局部注射抑制兔耳增生性瘢痕的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、瘢痕，尤其是病理性瘢痕(增生性瘢痕和瘢痕疙瘩)，給患者的身體和精神帶來(lái)嚴(yán)重?fù)p害，因此是整形乃至整個(gè)外科領(lǐng)域研究的重點(diǎn)。迄今為止，雖然有多種治療方法，但是缺乏一種可靠而有效的方法。目前藥物治療中最常用的是糖皮質(zhì)激素局部應(yīng)用。糖皮質(zhì)激素通過(guò)抑制成纖維細(xì)胞增殖及膠原合成、促進(jìn)細(xì)胞凋亡對(duì)病理性瘢痕有明顯的療效，但長(zhǎng)期應(yīng)用容易引起患者內(nèi)分泌紊亂，這一副作用使之在臨床上應(yīng)用時(shí)受到限制。尋找一種良好的病理性瘢痕治療的局部用藥一直是皮膚科和整形科醫(yī)師關(guān)

2、注的焦點(diǎn)曲尼司特(Tranilast，TNL)化學(xué)名為N-(3’，4’---二甲氧基肉桂酰)氨茴酸，臨床上常用于治療變態(tài)反應(yīng)性疾病。通過(guò)抑制肥大細(xì)胞和嗜堿細(xì)胞釋放化學(xué)介質(zhì)阻止變態(tài)反應(yīng)發(fā)生。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)TNL在體外實(shí)驗(yàn)中可抑制多種類型基質(zhì)成纖維細(xì)胞(如：眼、腎、肝、肺成纖維細(xì)胞)的增殖及膠原合成作用。在內(nèi)臟纖維化動(dòng)物模型中經(jīng)口服給藥TNL可減緩內(nèi)臟纖維化疾病的程度，并認(rèn)為作用機(jī)理可能與TGFβ1/Smad3細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑有關(guān)。

3、皮膚病理性瘢痕主要是皮膚創(chuàng)傷后細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)異常沉積的結(jié)果，TNL是否可以通過(guò)抑制ECM沉著干預(yù)病理性瘢痕的預(yù)體外實(shí)驗(yàn)：在體外培養(yǎng)的中華倉(cāng)鼠的肺(V79)成纖維細(xì)胞及人皮膚增生性瘢痕原代培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞(HF)中，觀察不同濃度的TNL對(duì)其增殖活性的影響。用血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)刺激HF細(xì)胞，提高細(xì)胞增殖活性，觀察TNL對(duì)HF細(xì)胞增殖活性的影響。用MYT法測(cè)定干預(yù)后細(xì)胞增殖活性，逆轉(zhuǎn)錄PCR方法測(cè)定TGF β1、Smad3、

4、Smad7的表達(dá)情況。 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：建立兔耳增生性瘢痕模型。在模型中采用測(cè)量瘢痕厚度變化、HE染色、苦味酸．天狼星紅染色、Ⅰ/Ⅲ膠原含量測(cè)定，觀察TNL混懸液局部注射對(duì)瘢痕形成的影響。 研究結(jié)果:TNL能有效地抑制體外培養(yǎng)的V79細(xì)胞的增殖活性，其作用呈量效依賴關(guān)系。TNL對(duì)原代培養(yǎng)的HF細(xì)胞增殖活性無(wú)明顯影響。在PDGF刺激后HF細(xì)胞增殖活性明顯提高，TNL可以抑制PDGF誘導(dǎo)后的HF細(xì)胞的增殖活性。TNL能有效地抑制H

5、F細(xì)胞TGFβ1、Smad3的表達(dá)水平，其抑制作用呈明顯的量效關(guān)系。HF細(xì)胞中Smad7無(wú)表達(dá)，TNL對(duì)其表達(dá)水平無(wú)影響。TNL羧甲基纖維素鈉混懸液(CMC-Na)局部注射兔耳增生性瘢痕可抑制瘢痕增生程度，但并不影響瘢痕的消退程度。HE染色及苦昧酸．天狼星染色發(fā)現(xiàn)TNL能降低細(xì)胞外膠原含量，降低Ⅰ/Ⅲ型膠原比例。 研究結(jié)論:體外培養(yǎng)的HF及V79細(xì)胞、兔耳增生性瘢痕動(dòng)物模型均可作為研究組織纖維化疾病的治療和探索其機(jī)理的良好平臺(tái)。