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文檔簡介
1、目的:研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)對長春新堿(VCR)作用于人淋巴瘤Raji細(xì)胞化療增敏的作用及機(jī)制,為摸索治療淋巴瘤合理的藥物組合提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:1、體外培養(yǎng)Raji細(xì)胞,采用CCK-8法測定DADS和VCR對Raji細(xì)胞的增殖抑制率,確定DADS的無毒劑量和VCR的IC50。
2、用無毒劑量的DADS、VCR單藥、無毒劑量DADS和VCR聯(lián)合應(yīng)用作用于Raji細(xì)胞
2、,采用CCK-8法檢測各自的抑制率,應(yīng)用金氏公式求q值,評價(jià)聯(lián)合用藥效果,確定DADS是否有化療增敏效應(yīng)。
3、采用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡百分率的變化。
4、采用細(xì)胞免疫化學(xué)法檢測細(xì)胞Bcl-2及Bax的表達(dá)情況,并用病理圖象分析軟件進(jìn)行半定量分析,以探討DADS化療增敏的可能機(jī)制。
結(jié)果:1、VCR(6.25,12.5,25.0μg/ml)單藥、無毒劑量的DADS(0.625,1.25μg/m
3、l)單藥、VCR(6.25,12.5,25.0μg/ml)和DADS(0.625,1.25μg/ml)聯(lián)合應(yīng)用作用于gaji細(xì)胞,聯(lián)合組細(xì)胞生長抑制率均明顯高于相應(yīng)VCR單藥組(P<0.05),q>1.15,DADS具有增敏作用。
2、VCR(6.25,12.5,25.0μg/ml)、無毒劑量的DADS(0.625μg/ml)、VCR(6.25,12.5,25.0μg/ml)和DADS(0.625μg/ml)聯(lián)合作用細(xì)胞2
4、4h后,VCR可誘導(dǎo)Raji細(xì)胞凋亡,而聯(lián)合用藥時(shí)細(xì)胞的凋亡率均明顯高于相應(yīng)VCR單藥組(P<0.05)。
3、VCR(6.25,12.5,25.0μg/ml)與細(xì)胞作用后可下調(diào)Bcl-2的表達(dá)、上調(diào)Bax;而VCR(6.25,12.5,25.0μg/ml)與無毒劑量的DADS(0.625μg/ml)合用時(shí)細(xì)胞Bcl-2的表達(dá)率明顯低于相應(yīng)VCR單藥組(P<0.05)、Bax的表達(dá)率明顯高于相應(yīng)VCR單藥組(P<0.05)
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