哮喘疾病中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)的初步研究.pdf

1、通過建立大鼠缺鋅哮喘模型來觀察飲食鋅和地塞米松處理哮喘大鼠后肺組織和外周血白細(xì)胞中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)的影響；檢測正常對照嬰兒及哮喘嬰兒外周血白細(xì)胞中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體mRNA表達(dá)的變化，初步探討哮喘疾病中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)的變化。研究方法：
　　 一、20只wistar大鼠（年齡3-4周）隨機(jī)分為4組：低鋅哮喘組、哮喘組、對照組和地塞米松處理組。低鋅組飼喂缺鋅飼料，其他組飼喂正常飼料；按文獻(xiàn)所提供方法獲得大鼠哮喘模型；每兩天記錄一次大鼠的體重、攝食量

2、。五周之后處死動物，檢測肺組織和血清鋅含量，RT-PCR方法檢測肺組織和外周血白細(xì)胞中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體mRNA的表達(dá)。
　　 二、臨床收集9例正常對照嬰兒以及9例哮喘嬰兒血常規(guī)數(shù)據(jù)、ELISA檢測血液中IgE含量、原子吸收分光光度計(jì)檢測血清鋅含量，通過RT-PCR方法檢測外周血白細(xì)胞中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體mRNA表達(dá)。
　　 一、低鋅哮喘組大鼠攝食量較其他組有明顯的下降，而對照組、哮喘組以及地塞米松處理組之間沒有明顯的差別。同樣在低鋅哮喘組

3、，大鼠體重明顯低于其他各組，而對照組、哮喘組和地塞米松組則沒有明顯的區(qū)別；低鋅哮喘組大鼠肺組織鋅含量顯著低于其他各組，而對照組、哮喘組以及地塞米松組之間肺組織鋅含量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別；與對照組相比低鋅哮喘組大鼠肺組織ZnT-lmRNA表達(dá)下降了45％，哮喘組中ZnT-ImRNA表達(dá)上升了67％，地塞米松干預(yù)組ZnT-1mRNA表達(dá)上升了45％; ZIP-8mRNA和ZIP-13mRNA在對照組中的表達(dá)明顯低于缺鋅哮喘組、哮喘組以及地塞米松干預(yù)

4、組；與哮喘組相比，低鋅哮喘組中ZnT-lmRNA顯著下降了67％，ZIP-8mRNA和ZIP-13mRNA表達(dá)升高，地塞米松干預(yù)組中ZnT-ImRNA、ZIP-8mRNA和ZIP-13mRNA表達(dá)均沒有明顯的改變。
　　 二、哮喘嬰兒血清鋅含量顯著低于對照組嬰兒(P<0.O1)；哮喘患兒外周血免疫球蛋白E含量明顯高于正常對照組嬰兒：哮喘組嬰兒和對照組嬰兒外周血，白細(xì)胞中ZnT-I，ZnT-3，ZnT-5，ZIP-I mRNA表達(dá)

5、沒有顯著的差異；哮喘患兒組外周血白細(xì)胞中ZIP-2mRNA表達(dá)明顯高于對照組嬰兒(P<0.01)。
　　 低鋅干預(yù)后，低鋅哮喘組大鼠肺組織ZnT-ImRNA的表達(dá)降低，ZIP-8mRNA和ZIP-13mRNA表達(dá)升高；哮喘模型大鼠肺組織ZnT-ImRNA、ZIP-8mRNA和ZIP-13mRNA表達(dá)增加，地塞米松干預(yù)后，鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)無明顯改變；哮喘兒童外周血白細(xì)胞中，ZIP-2mRNA表達(dá)明顯升高。
　　 鋅是生物體必需

6、的微量元素，六大功能性蛋白家族中超過300種金屬酶需要鋅作為其關(guān)鍵的結(jié)構(gòu)組分或者是輔助因子，廣泛參與生物體代謝，還涉及到細(xì)胞的生長、增殖和分化。兩個(gè)大的基因家族參與了哺乳動物鋅的代謝調(diào)節(jié)：ZnT和ZIP。ZnT蛋白能夠促進(jìn)細(xì)胞質(zhì)鋅的外流以及使鋅在各細(xì)胞器內(nèi)區(qū)室化，從而降低細(xì)胞漿鋅的含量；ZIP則能夠增加鋅的內(nèi)流攝取或者促進(jìn)細(xì)胞器內(nèi)鋅的釋放，來增加胞漿中鋅的含量。在哺乳動物中，飲食中鋅水平不足會導(dǎo)致皮膚病病變，生長遲緩，精神障礙，并損害免

7、疫系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)。在動物中，鋅平衡的保持主要是通過調(diào)節(jié)腸吸收率，過量鋅的排除，腎重吸收和分配到細(xì)胞中，包括細(xì)胞內(nèi)存儲。很多文獻(xiàn)中提到急性和慢性炎性疾病實(shí)驗(yàn)動物模型中鋅的代謝發(fā)生改變，病例對照研究發(fā)現(xiàn)，鋅攝入量低的人遺傳過敏癥，哮喘和過敏性反應(yīng)型的癥狀相結(jié)合的風(fēng)險(xiǎn)是鋅攝入量高的人的4到5倍，哮喘病人血清鋅含量要低于健康對照患者。哮喘和鋅缺乏都被認(rèn)為是有利于Th2細(xì)胞炎性因子產(chǎn)生，系統(tǒng)性鋅缺乏的哮喘病人有可能進(jìn)一步增加Th2細(xì)胞促炎性因子的

8、產(chǎn)生。哮喘是許多慢性炎癥疾病中的一種，是世界公認(rèn)的醫(yī)學(xué)難題，被世界衛(wèi)生組織列為疾病中四大頑癥之一。據(jù)調(diào)查，在我國至少有2000萬以上哮喘患者，哮喘的發(fā)病機(jī)制和發(fā)病原因非常復(fù)雜，因此探討哮喘疾病中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)以及鋅對鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)的影響很有必要。
　　 本課題檢測了哮喘嬰幼兒外周血白細(xì)胞中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體mRNA表達(dá)情況，在兒童哮喘的鋅研究領(lǐng)域還是首次；同時(shí)，使用鋅和地塞米松處理哮喘模型大鼠，觀察部分鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)情況，為哮喘的發(fā)生，發(fā)展機(jī)