B淋巴細(xì)胞刺激因子治療性疫苗的研究.pdf

1、 B淋巴細(xì)胞刺激因子（BLys)是1999年由瑞士和美國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)的腫瘤壞死因子家族的一個(gè)新成員。該BLyS主要由T細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等髓系來源的細(xì)胞分泌。BLyS以膜結(jié)合以及可溶性兩種方式存在于機(jī)體中，兩者均具有生物學(xué)活性。本研究擬獲得一種BLyS治療性疫苗用于自身免疫性疾病的治療。由于直接使用BLyS分子可能會(huì)存在免疫原性弱或者由于其B細(xì)胞刺激活性而給自身免疫性疾病雪上加霜。為此，本文將BLyS的膜外受體結(jié)合區(qū)段(134-285

2、位殘基)與TT抗原肽融合后克隆入pKKH原核非融合表達(dá)載體，在大腸桿菌中進(jìn)行了融合表達(dá)，表達(dá)的目的蛋白TT-BLyS為不溶性的包涵體。由于該蛋白質(zhì)的溶解性特別差，用劇烈的條件對包涵體進(jìn)行了洗滌，洗滌后純度可達(dá)到80﹪以上。包涵體用7 M鹽酸胍溶解后進(jìn)行凝膠過濾層析，可以獲得高純度的目的蛋白。純化產(chǎn)物分別免疫新西蘭兔、小鼠和大鼠，在動(dòng)物體內(nèi)可以誘導(dǎo)出高滴度的抗體。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明誘導(dǎo)的多克隆抗體可以中和天然BLyS的活性。當(dāng)用于疾病模型研究