青蒿琥酯對(duì)人大腸癌細(xì)胞增殖和凋亡影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究青蒿琥酯(artesunate，ART)對(duì)人大腸癌細(xì)胞株LoVo細(xì)胞增殖和凋亡的影響，以探討青蒿琥酯對(duì)大腸癌LoVo細(xì)胞作用可能的作用機(jī)制。 方法：采用不同濃度ART和(或)5-FU處理大腸癌LoVo細(xì)胞后，MTT法觀察其對(duì)細(xì)胞增殖的影響，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ART作用前后細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞周期的變化，免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)ART作用前后細(xì)胞Survivin、bcl-2、bax表達(dá)水平的變化，RT-PCR檢測(cè)不同濃度的ART(3.

2、125μg/ml、12.5μg/ml、50μg/ml)作用于大腸癌LoVo細(xì)胞時(shí)對(duì)凋亡抑制基因Survivin表達(dá)的影響。 結(jié)果：(1) MTT法顯示ART可明顯抑制LoVo細(xì)胞的生長(zhǎng)，并隨著濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng)而明顯增強(qiáng)(P<0.05或P<0.01)， (2)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)出LoVo細(xì)胞經(jīng)ART作用48小時(shí)后可見(jiàn)有細(xì)胞凋亡峰，細(xì)胞凋亡率與ART濃度呈正相關(guān)，且隨著濃度的增加LoVo細(xì)胞周期G<,0>+G<,1>期

3、細(xì)胞比例上升，S期細(xì)胞比例下降(P<0.05或P<0.01)， (3)免疫細(xì)胞化學(xué)法結(jié)果顯示ART作用于LoVo細(xì)胞48小時(shí)可使細(xì)胞中的Survivin、bcl-2蛋白表達(dá)下降，baX蛋白表達(dá)升高，(P<0.01)， (4)RT-PCR檢測(cè)表明LoVo細(xì)胞經(jīng)不同濃度的ART(3.125μg/ml、12.5μg/ml、50μg/ml)作用48小時(shí)后，Survivin的表達(dá)呈劑量依賴性降低(P<0.01)。 結(jié)論：A