白香丹對(duì)PMS肝氣逆證模型大鼠不同腦區(qū)GABA_B受體亞基分布表達(dá)及海馬ERK1-2信號(hào)通路的影響.pdf

1、目的:檢測(cè)PMS肝氣逆模型大鼠額區(qū)、頂區(qū)、海馬和下丘腦相關(guān)區(qū)域內(nèi)GABAB受體亞單位(GABABR1和GABABR2)分布表達(dá)及海馬ERK1/2信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)變化,初步探討PMS肝氣逆證發(fā)病的中樞機(jī)制,并研究白香丹膠囊對(duì)該病證的干預(yù)機(jī)制。
　　方法:通過曠場實(shí)驗(yàn)、宏觀行為藥理學(xué)方法、陰道涂片法篩選健康雌性Wistar大鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn),采用電刺激應(yīng)激法復(fù)制PMS肝氣逆證大鼠模型,以曠場實(shí)驗(yàn)結(jié)合宏觀行為藥理學(xué)評(píng)價(jià)模型,用免疫熒光雙

2、標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)GABABR1和GABABR2在正常對(duì)照組大鼠、PMS肝氣逆模型組大鼠、白香丹給藥組大鼠、巴氯芬給藥組大鼠額區(qū)、頂區(qū)、海馬CA1、CA3和下丘腦中的分布表達(dá),計(jì)算平均熒光強(qiáng)度(IMF),并以免疫印記技術(shù)檢測(cè)ERK1/2、P-ERK1/2在以上四組大鼠海馬中的表達(dá)水平,計(jì)算P-ERK1/2在ERK1/2中的百分比。
　　結(jié)果:與正常組大鼠相比,模型組大鼠垂直得分、水平得分和總分均顯著性增加(P＜0.01),大鼠表現(xiàn)出緊張

3、警覺,環(huán)顧四周,對(duì)外界刺激敏感的狀態(tài);而造模并給予藥物治療的大鼠較模型組曠場實(shí)驗(yàn)三項(xiàng)得分均顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)。免疫熒光雙標(biāo)記結(jié)果顯示,與正常組大鼠相比,模型組大鼠額區(qū)、頂區(qū)、海馬CA1、CA3、下丘腦GABABR1和GABABR2表達(dá)水平顯著降低(P＜0.01);與模型組大鼠相比,白香丹組和巴氯芬組大鼠GABABR1和GABABR2蛋白在以上區(qū)域的表達(dá)水平明顯上升(P＜0.01或P＜0.05),但兩組之間沒有顯著性差

4、異(P＞0.05)。免疫印記結(jié)果顯示,與正常組大鼠相比,模型組大鼠海馬中P-ERK1/2表達(dá)水平下降(P＜0.01);與模型組大鼠相比,白香丹和巴氯芬給藥后大鼠P-ERK1/2水平有所上升(P＜0.01),且白香丹組與巴氯芬組相比有顯著性差異(P＜0.01)。
　　結(jié)論:電刺激應(yīng)激造模法可以成功制備PMS肝氣逆證大鼠模型;PMS肝氣逆證的發(fā)生可能與大鼠頂區(qū)、額區(qū)、海馬CA1、CA3、下丘腦GABAB受體亞單位蛋白以及海馬中P-ER