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文檔簡介
1、目的:
探討游離脂肪酸(free fatty acid,F(xiàn)FA)對大鼠甲狀腺細胞(Fischer rat thyroid cell line-5,F(xiàn)RTL-5)增殖的影響。
方法:
1、分別用不同濃度FFA、同一時間和同一濃度FFA、不同時間干預大鼠FRTL-5細胞,MTT比色法檢測大鼠FRTL-5細胞增殖的情況。
2、用不同濃度FFA干預大鼠FRTL-5細胞48h,Western blottin
2、g檢測Wnt/β-catenin信號通路中糖原合成酶激酶-3β(Glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)和β-連環(huán)蛋白(β-catenin)表達的變化。
3、用不同濃度FFA、不同作用時間干預大鼠FRTL-5細胞,ELISA測三碘甲狀腺原氨酸(Triiodothyronin,T3)、甲狀腺素(Thyroxine,T4)水平。
結(jié)果:
1、MTT結(jié)果顯示:大鼠FRTL-5細胞經(jīng)不
3、同濃度的FFA干預48h,與正常對照組相比,0.5、1.0mmol/LFFA組的細胞存活率略有降低(p>0.05),1.5、2.0、2.5、3.0mmol/LFFA組的細胞存活率呈濃度依賴性降低(p<0.05),2.5mmol/LFFA組對大鼠FRTL-5細胞增殖的抑制程度較1.5、2.0mmol/LFFA組明顯(p<0.05),而與3.0mmol/L FFA組相比,抑制效應無明顯差別(p=0.71)。同時,大鼠FRTL-5細胞經(jīng)2.5
4、mmol/L FFA分別干預6、12、24、48h,與正常對照組相比,6、12h組的細胞存活率略有降低(p>0.05),24、48h組的細胞存活率顯著降低(p<0.05),48h組對大鼠FRTL-5細胞增殖的抑制程度較24h組明顯(p<0.05)。
2、Western blotting結(jié)果顯示:大鼠FRTL-5細胞經(jīng)不同濃度的FFA干預48h,與正常對照組相比,0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L FFA組GSK
5、-3β的表達呈濃度依賴性升高(p<0.05),而0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L FFA組β-catenin的表達呈濃度依賴性降低(p<0.05)。
3、ELISA結(jié)果顯示:大鼠FRTL-5細胞經(jīng)不同濃度FFA、不同時間干預,不同濃度FFA對T3、T4水平有影響(P<0.05),不同時間對T3、T4水平也有影響(P<0.05),濃度、時間兩者之間有交互作用(P<0.05),當2.5mmol/LFFA干預大鼠F
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