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文檔簡介
1、目的:以具有晝夜節(jié)律的大鼠為生物模型,研究900MHz微波輻射對大鼠晝夜節(jié)律的影響,包括:(1)自發(fā)活動的晝夜節(jié)律變化;(2)褪黑素分泌水平的晝夜節(jié)律變化;(3)松果體中NAT基因表達水平的晝夜節(jié)律變化,初步探討其可能的機理,為進一步了解移動通訊微波輻射的生物效應和健康影響提供實驗資料。
方法:(1)動物的篩選和分組:清潔級 SD雄性大鼠,在光暗周期為12h:12h(光照時間為7點到19點)的光制下飼養(yǎng)8周培養(yǎng)晝夜節(jié)律性,光照
2、強度為300 Lux,隨后放入自發(fā)活動視頻分析系統(tǒng)進行24h自發(fā)活動觀測,以平均速度為觀測指標。數(shù)據(jù)經余弦分析軟件獲取節(jié)律性參數(shù)并擬合為相位響應曲線(phase response curves, PRCs),對振幅作F檢驗,確定是否存在晝夜節(jié)律性。篩選出具有明顯晝夜節(jié)律性的大鼠,按完全隨機設計將動物分為對照組、光照組、ZT3組和ZT15組。(2)微波和可見光照射:ZT3組和ZT15組分別在自發(fā)活動的谷值時點(ZT3點)和峰值時點(ZT1
3、5點)接受40μw/cm2,900MHz微波輻射,1h/d,連續(xù)14d。光照組在峰值時點(ZT15點)接受強度為300 Lux的光照,1h/d,連續(xù)14d。對照組放入GTEM室,但不接受輻射。(3)節(jié)律參數(shù)獲?。赫丈淝昂蟛杉园l(fā)活動的平均速度;照射后每只大鼠每隔4h心臟取血,ELISA法測定血漿褪黑素濃度;照射后各實驗組每隔4h采集3只大鼠松果體,共采集6個時點,用半定量RT-PCR測定NAT基因表達水平。利用余弦節(jié)律軟件,根據(jù)方程式F
4、(t)=M+Acos(ωt+Φ)將各指標數(shù)據(jù)擬合為相位響應曲線,得出中值(Mesor, M)、振幅(Amplitude, A)以及峰相位時相(period,Φ)三個余弦參數(shù),分析三個余弦參數(shù)的變化。
結果:1.自發(fā)活動的晝夜節(jié)律性變化:(1)對照組、光照組、ZT3組和ZT15組自發(fā)活動在照射前后均顯示出明顯的晝夜節(jié)律性(平均速度的節(jié)律參數(shù)振幅 A經F檢驗,p<0.05)。(2)與照射前相比,對照組晝夜節(jié)律 M、A以及Φ三個余弦
5、參數(shù)未發(fā)生明顯變化,照射前峰值時點由ZT15.20點變?yōu)閆T15.67點(p>0.05);與照射前相比,光照組中值、振幅降低(p<0.05),時相滯后,峰值時點由ZT15.22點延遲至ZT20.82點(p<0.05);ZT3組中值、振幅降低(p<0.05),時相發(fā)生滯后,峰值時點由ZT15.69點延遲至ZT18.7點(p<0.05);ZT15組中值、振幅降低(p<0.05),時相發(fā)生滯后,峰值時點由ZT15.21點延遲至ZT16.37點
6、(p<0.05)(3)與光照組相比,ZT3組與ZT15組中值、振幅降低程度低于光照組,時相滯后程度小于光照組。
2.血漿褪黑素水平的晝夜節(jié)律性變化:(1)照射后,對照組、光照組、ZT3組和ZT15組血漿褪黑素濃度的節(jié)律參數(shù)振幅A經F檢驗,p<0.05,褪黑素水平顯示出明顯的晝夜節(jié)律性。(2)與對照組相比,光照組的中值、振幅降低(p<0.05),時相發(fā)生滯后,對照組峰值時點為 ZT13.89點,光照組峰值時點為 ZT20.35點
7、;與對照組相比,ZT3組中值、振幅降低(p<0.05),時相發(fā)生滯后,ZT3組峰值時點延遲至ZT20.08點;與對照組相比,ZT15組振幅降低(p<0.05),時相發(fā)生滯后,峰值時點延遲至ZT16.25點,中值未出現(xiàn)明顯變化(p>0.05)。
3. NAT基因表達水平晝夜節(jié)律變化:(1)照射后,對照組、光照組、ZT3組和ZT15組大鼠松果體NAT基因表達水平均呈現(xiàn)出明顯晝夜節(jié)律性。(2)與對照組相比,光照組的中值、振幅降低(p
8、<0.05),時相發(fā)生滯后,對照組峰值時點為ZT12.83點,光照組峰值時點延遲至 ZT16.87點(p<0.05);與對照組相比,ZT3組中值、振幅降低(p<0.05),時相發(fā)生滯后,峰值時點延遲至ZT15.64點(p<0.05);與對照組相比,ZT15組時相發(fā)生滯后,峰值時點延遲至ZT14.42點(p<0.05),中值與振幅未出現(xiàn)明顯變化(p>0.05)。
結論:1.900MHz微波輻射對大鼠的自發(fā)活動、血漿褪黑素水平以及
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