siRNA對(duì)肝癌組織中特異性異常表達(dá)FGFR3基因的抑制效應(yīng)及作用機(jī)制.pdf

1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文siRNA對(duì)肝癌組織中特異性異常表達(dá)FGFR3基因的抑制效應(yīng)及作用機(jī)制姓名：沈柏用申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)（普外科）指導(dǎo)教師：李宏為20060501上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)磽搏學(xué)位論文非癌肝臟組織基因表達(dá)差異非常明顯，涉及不同種類、不同功能、不同調(diào)控作用途徑的各種基因。我們將這些基因分為4類：1)肝臟管家基因、正常功能和結(jié)構(gòu)基因；2)癌前病變相關(guān)基因；3)腫痛相關(guān)基因；4)與腫瘤無(wú)關(guān)的其他基因。基于基因_心H片結(jié)果

2、，我們著重比較了轉(zhuǎn)錄調(diào)控基因的表達(dá)變化，總共10個(gè)基因在肝癌組織中較非癌肝臟組織明顯表達(dá)增高，包括轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)因子EIF一2，GTP結(jié)合蛋白，CDC2相關(guān)蛋白激酶，F(xiàn)GFR3，延伸因子一lB。而胰島素樣生長(zhǎng)因子，MAP2K5，細(xì)胞周期素D1以及其它4種基因在肝癌組織中表達(dá)降低。第二部分肝癌組織特異性異常表達(dá)FGFR3基因及其可能機(jī)制首先采用Northern印跡法和實(shí)時(shí)熒光定量PCR法證實(shí)FGFR3在肝癌組織、非癌肝臟組織、肝癌細(xì)胞株和正常胎

3、肝細(xì)胞株CL一48中的表達(dá)差異。經(jīng)過(guò)ImageQuantity半定量分析，經(jīng)GAPDH內(nèi)參照校正，F(xiàn)GFR3在肝癌組織中的表達(dá)大約是其在非癌肝臟組織中的4倍，而肝癌細(xì)胞株約為CL一48的25倍。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果提示肝癌組織中FGFR3的表達(dá)是非癌肝臟組織中的21l一835倍，平均為46l倍，由此我們證實(shí)基因芯片結(jié)果的可靠和一致。繼而在保證病人隱私的情況下，從病理學(xué)檔案中搜集了55例肝癌標(biāo)本。采用免疫組化法半定量研究目的基因FGFR