預防性應用5-HT-,3-受體拮抗劑對內(nèi)臟痛高敏感幼鼠痛敏感性及結(jié)腸P物質(zhì)表達的影響.pdf

1、目的：采用行為學和電生理學評價方法，探討預防性應用5-HT3受體拮抗劑對新生期反復結(jié)直腸刺激(Colorectal Irritation，CI)建立內(nèi)臟痛覺高敏感性模型幼鼠內(nèi)臟痛覺敏感性影響；比較各組幼鼠結(jié)腸P物質(zhì)(substance P，SP)表達，探討結(jié)腸SP異常表達在幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏形成中作用，為臨床上采取有效防治措施及開發(fā)治療藥物提供理論依據(jù)。
　　 方法：①32只SD新生大鼠按2×2析因設計分成4組，每組8只，A1B1

2、組：新生期反復CI，建立幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏感模型，15～21d腹腔注射雷莫司瓊；A1B2組：新生期反復CI，建立幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏感模型，15～21d腹腔注射生理鹽水；A2B1組：新生期未接受CI，15～21d腹腔注射雷莫司瓊；A2B2組：新生期未接受CI，15～21d腹腔注射生理鹽水。常規(guī)飼養(yǎng)到幼鼠期(6周齡)，通過觀察大鼠在不同壓力結(jié)直腸擴張(ColorectalDistension，CRD)刺激后的腹壁撤退反射(AWR)評分、內(nèi)臟痛閾

3、和腹外斜肌放電測量進行內(nèi)臟痛覺敏感性評價，選取降結(jié)腸進行病理學檢查。②32只SD新生大鼠按2×2析因設計分成4組，每組8只，A1B1組：新生期反復CI，建立幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏感模型，15～21d腹腔注射雷莫司瓊；A1B2組：新生期反復CI，建立幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏感模型，15～21d腹腔注射生理鹽水；A2B1組：新生期未接受CI，15～21d腹腔注射雷莫司瓊；A2B2組：新生期未接受CI，15～21d腹腔注射生理鹽水。常規(guī)飼養(yǎng)到幼鼠期(6周齡

4、)，應用免疫組織化學染色及計算機圖像分析系統(tǒng)對結(jié)腸進行積分光密度值半定量分析。采用SPSS13.0軟件包進行統(tǒng)計分析，α=0.05為顯著性檢驗標準。
　　 結(jié)果：①幼鼠6周齡時，新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏感性模型可使痛閾降低，新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏感性模型的使AWR評分升高，新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏感性模型對于AWR評分的主效應在各個CRD壓力下都有統(tǒng)計學意義(F值分別是47.79、6.61、26.30、4.8

5、4，均P＜0.05)；預防性應用雷莫司瓊對于AWR評分降低，預防性應用雷莫司瓊對于AWR評分的主效應在各個CRD壓力下也都有統(tǒng)計學意義(F值分別是23.74、11.88、4.74、4.20、4.76，均P＜0.05)。新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏感性模型可使幼鼠腹外斜肌放電幅值在各個壓力下均升高，新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏感性模型對幼鼠腹外斜肌放電幅值主效應在各不同CRD壓力下均有顯著意義(F值分別為9.00、6.50、8.99、

6、4.02、4.98，均P≤0.05)；降結(jié)腸未見明顯病理組織損傷。②幼鼠6周齡時，A1B2組中結(jié)腸黏膜層、粘膜下層、肌層內(nèi)均出現(xiàn)密集棕黃色免疫陽性產(chǎn)物，SP陽性細胞多;A1B1組、A2B1組及A2B2組，結(jié)腸黏膜層、粘膜下層、肌層內(nèi)僅有極少量SP陽性細胞，免疫陽性產(chǎn)物著色淺淡，SP積分光密度值A1B1組肌層大于粘膜下層、粘膜層，差別有統(tǒng)計學意義，A1B2、A2B1、A2B2組各層積分光密度值均未見明顯差別。進一步對新生期CI及預防性應用

7、雷莫司瓊對于幼鼠結(jié)腸各層積分光密度值的主效應值進行隨機區(qū)組的方差分析，結(jié)果表明：粘膜層與肌層的的SP積分光密度值差別有統(tǒng)計學意義(P=0.002)，粘膜下層與肌層的SP積分光密度值差別也有統(tǒng)計學意義(P=0.004)，粘膜層與粘膜下層的SP積分光密度值差別沒有統(tǒng)計學意義(P=0.139)；幼鼠結(jié)腸粘膜層、粘膜下層、肌層SP積分光密度值均受到新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏感性模型和預防性應用雷莫司瓊影響，新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏感性