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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察安胃湯對(duì)慢性萎縮性胃炎大鼠血中表皮生長(zhǎng)因子及其受體表達(dá)量的影響,從而探討安胃湯治療慢性萎縮性胃炎療效的分子機(jī)制,從基因水平上闡釋名老中醫(yī)治療慢性萎縮性胃炎的學(xué)術(shù)理論。
方法:健康清潔級(jí)雄性Wistar大鼠84只,體重140~170克,完全隨機(jī)分為空白對(duì)照組(A組)、病理模型組(B組)、安胃湯大劑量組(C組)、安胃湯中劑量組(D組)、安胃湯小劑量組(E組)、維酶素對(duì)照組(F組)、胃復(fù)春對(duì)照組(G組)共七組,每組12只。
2、空白組給予正常飲食進(jìn)水,其余六組采用甲基硝基亞硝基胍(MNNG)溶液建立慢性萎縮性胃炎大鼠模型。于造模成功后開(kāi)始,安胃湯大劑量組、安胃湯中劑量組、安胃湯小劑量組、維酶素對(duì)照組、胃復(fù)春對(duì)照組分別給予藥物灌胃治療4周;空白組,病理模型組同時(shí)給予每天每只2 ml生理鹽水灌胃。各組大鼠禁食12h,將大鼠麻醉,股動(dòng)靜脈取血,ACD抗凝,淋巴細(xì)胞分離液分離有核血細(xì)胞,提取有核細(xì)胞總RNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄成cDNA,設(shè)計(jì)合成EGF和EGFR特異性引物,通過(guò)
3、real-time PCR的方法檢測(cè)7組大鼠血中EGF和EGFR基因表達(dá)的差異;同時(shí)剖腹取胃,沿胃大彎剪開(kāi),并向胃竇近幽門口至胃大彎方向取1.0㎝×1.0㎝×0.5㎝胃粘膜組織,臵于10%甲醛固定,作常規(guī)石臘包埋切片,做胃黏膜組織病理觀察。
結(jié)論:1.胃黏膜大體形態(tài)觀察:通過(guò)觀察皺襞多少、走向,黏膜色澤,是否有出血等情況,發(fā)現(xiàn)病理模型組皺襞減少或消失,走向紊亂,表面粘液少,黏膜色澤淡白或灰白,且部分伴有散在出血點(diǎn)。經(jīng)安胃湯大、
4、中、小劑量組,維酶素對(duì)照組、胃復(fù)春對(duì)照組治療后,胃黏膜損害均有不同程度的改善,以安胃湯大劑量組效果最為明顯。2.胃黏膜光學(xué)顯微鏡觀察:通過(guò)觀察胃黏膜上皮細(xì)胞排列狀況、固有腺體數(shù)量,有無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等情況,發(fā)現(xiàn)病理模型組固有腺體數(shù)量明顯減少,排列紊亂,有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。經(jīng)安胃湯大、中、小劑量組,維酶素對(duì)照組,胃復(fù)春對(duì)照組治療后,胃黏膜萎縮有不同程度的逆轉(zhuǎn),以安胃湯大劑量組效果最為明顯。3.病理模型組血清中EGF含量明顯高于空白組,兩者比較有
5、顯著差異(P<0.01)。安胃湯大、中、小劑量組、維酶素對(duì)照組、胃復(fù)春對(duì)照組與病理模型組相比均能明顯降低血清中EGF含量,與之比較均有顯著差異(P<0.05),說(shuō)明安胃湯、維酶素對(duì)照組、胃復(fù)春對(duì)照組均能有效調(diào)控血清中EGF含量;安胃湯大劑量組EGF值與空白對(duì)照組EGF值最為接近,兩組比較差異無(wú)顯著意義(P>0.05),且安胃湯大劑量組與維酶素對(duì)照組、胃復(fù)春對(duì)照組比較差異有顯著意義(P<0.05),安胃湯中、小劑量組與維酶素對(duì)照組、胃復(fù)春
6、對(duì)照組EGF含量比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。4.病理模型組血清中EGFR含量明顯高于空白對(duì)照組,兩者比較有顯著差異(P<0.01)。安胃湯大、中、小劑量組、維酶素對(duì)照組、胃復(fù)春對(duì)照組與病理模型組相比均能明顯降低血清中 EGFR含量,與之比較有顯著差異(P<0.05),說(shuō)明安胃湯、維酶素對(duì)照組、胃復(fù)春對(duì)照組均能有效調(diào)控血清中EGF含量;安胃湯大劑量組EGFR值與空白對(duì)照組EGF值最為接近,兩組比較差異無(wú)顯著意義(P>0.05),且安胃
7、湯大劑量組與維酶素對(duì)照組、胃復(fù)春對(duì)照組比較差異有顯著意義(P<0.05),安胃湯中、小劑量組與維酶素對(duì)照組、胃復(fù)春對(duì)照組EGFR含量比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。
結(jié)論:1.安胃湯可以調(diào)控血液中EGF的表達(dá)水平,改善胃黏膜狀態(tài),促使胃黏膜修復(fù);2.安胃湯能夠顯著改善胃黏膜組織病理形態(tài);3.安胃湯可以治療CAG,其機(jī)理可能是通過(guò)降低EGF及EGFR在血液中的表達(dá),改善微循環(huán),增加胃黏膜血流量,增強(qiáng)黏膜屏障的防御和修復(fù)的功能,從
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