三種藥劑對青枯雷爾氏菌在煙草體內定殖的影響及機理研究.pdf

1、1、利用同源重組的原理，采用自然轉化法將質粒pRCG-Pps-Lux中的發(fā)光酶基因成功地導入到青枯雷爾氏菌CQPS菌株的基因組中，得到Lux基因標記菌株CQPS-Lux。對標記菌株的菌落形態(tài)、生長曲線、致病力以及遺傳穩(wěn)定性等進行測定，結果表明：標記菌株CQPS-Lux在菌落形態(tài)及生長曲線、致病力等基礎生物學特性上與原始菌株CQPS沒有顯著差異且標記菌株CQPS-Lux的LuxCDABE基因具有良好的遺傳穩(wěn)定性。說明標記菌株CQPS-Lu

2、x可以作為青枯雷爾氏菌定殖研究中的有效工具進行下一步研究。
　　2、利用標記菌株CQPS-Lux對其在寄主植物煙草體內的定殖動態(tài)以及不同發(fā)病時期的分布情況進行了系統(tǒng)性研究，研究結果表明：青枯雷爾氏菌在煙草體內的遷移途徑為根部→莖基部→莖中部→莖上部。青枯雷爾氏菌侵染到煙草體內后，在煙草根部以及下部莖定殖后再向煙草中上部莖進行侵染遷移；青枯雷爾氏菌在煙草植株不同組織中的侵染定殖動態(tài)基本一致，煙草植株組織內的青枯雷爾氏菌含量先緩慢地增

3、加一段時間后迅速上升到1010CFU/g的水平后開始有下降的趨勢；在不同的發(fā)病階段，煙草植株根部組織的含菌量均最大，煙草植株上部莖組織的含菌量均最小。煙草莖部組織的不同部位含菌量變化較大，在發(fā)病初期，含菌量從大到小依次為下部莖、中部莖、上部莖，隨著病情的發(fā)展，到發(fā)病中后期，中部莖的含菌量在發(fā)病的后期超過下部莖的含菌量。
　　3、分別研究了農用鏈霉素、中生菌素、噻菌銅等三種藥劑對青枯雷爾氏菌在煙草體內定殖的影響，并對這幾種藥劑對青枯

4、雷爾氏菌的運動性和生物膜形成以及對青枯雷爾氏菌相關基因表達的影響進行了研究，結果表明：農用鏈霉素、中生菌素、噻菌銅等三種藥劑處理在接菌1d、3d、5d后均能不同程度的減少青枯雷爾氏菌在煙草植株根部定殖量，農用鏈霉素和中生菌素對定殖量影響較大，與對照相比農用鏈霉素在處理后1d、3d、5d定殖量分別降低了76.38％、97.66%、89.98%、中生菌素在處理后1d、3d、5d定殖量分別降低了78.29%、98.33%、93.56，噻菌銅對

5、定殖量影響較小，在處理后1d、3d、5d定殖量分別降低了54.86%、36.15%、84.96%；農用鏈霉素、中生菌素對青枯雷爾氏菌生物膜的形成有顯著的抑制作用，噻菌銅在處理48h后能夠顯著抑制青枯雷爾氏菌生物膜的形成；農用鏈霉素、中生菌素、噻菌銅對青枯雷爾氏菌的運動性均有明顯的抑制作用；農用鏈霉素、中生菌素、噻菌銅等三種藥劑對青枯雷爾氏菌運動性相關基因MotA、MotB，鞭毛相關基因FlhC、FlhD、FlgM，趨化性相關基因CheA

6、、CheW等基因的表達均有顯著的抑制作用。
　　4、評價農用鏈霉素、中生菌素、噻菌銅三種藥劑不同施藥方式對煙草青枯病的防治效果，結果表明：農用鏈霉素、中生菌素、噻菌銅三種藥劑不同施藥方式處理對煙草青枯病發(fā)病均有不同程度的防治效果；不同的藥劑對煙草青枯病的防治效果不同，每種藥劑的最佳施藥方式是不一樣的；其中中生菌素穴施對煙草青枯病的防治效果最好，在移栽后7d、14d、22d時防效分別達到了93.51%、45.94%、41.67%，農