鹽酸戊乙奎醚對大鼠體外循環(huán)肝臟損傷的保護作用的研究.pdf

1、目的：探討鹽酸戊乙奎醚對大鼠體外循環(huán)肝臟損傷的保護作用及其機制。 方法:32只健康成年雄性清潔級SD大鼠隨機分4組，組8只，假手術組(Sham組)、型組(Mod組)、酸戊乙奎醚低劑量組(L-PHC組)、酸戊乙奎醚高劑量組(H-PHC組)。術前6h禁食水，10％水合氯醛0.3ml/100g腹腔注射，術中根據情況追加維持麻醉深度。通過鼠口插入氣管導管，連接小動物呼吸機。吸入純氧，呼吸頻率60次/分，吸呼比為1：2，潮氣量8-10ml

2、/kg，根據血氣分析結果調節(jié)呼吸機參數，使PaC02維持在35-45mmHg。經尾動脈插入22G靜脈留置針后接動脈測壓表；經股動脈逆行插入22G靜脈留置針作為動脈灌注管；經頸靜脈插入18G靜脈留置針穿刺直至右心房水平作為靜脈引流管，經股動脈側管注射肝素鈉500IU/kg肝素化后開始轉流(Sham組只進行上述操作不行CPB)。L-PHC與H-PHC組體外循環(huán)預充液中分別按0.6mg/Kg及2mg/kg加入鹽酸戊乙奎醚。轉流開始時灌注流量約

3、為35ml/kg/min，逐漸增加到80-100ml/kg/min。轉流開始后停呼吸機，氧合器供氧(FiO<,2> 100％)，氧流量與灌注流量比值保持在0.8-1.0。轉流過程中平均動脈壓保持在60.80mmHg。轉流開始后即應用變溫水箱注意保溫，轉流穩(wěn)定后將肛溫逐漸降至約32.0℃，轉流50-60min時逐漸復溫，直腸溫度達到約37.0℃時停止CPB，恢復機械通氣，總轉流時間60min左右。CPB過程中持續(xù)監(jiān)測心率、平均動脈壓(MA

4、P)、肛溫、呼吸頻率及動脈血氣(Sham組也進行相同監(jiān)測)。Mod組、L-PHC組、H-PHC組在停轉流(Sham組也于相同時點)取動脈血測定大鼠丙氨酸轉氨酶(ALT)、天冬氨酸轉氨酶(AsT)的活性，取血后立即處死大鼠，取肝臟組織于H-7200透射電鏡下觀察超微結構的變化。 結果:Mod組、L-PHC組、H-PHC組血清ALT、AST活性均高于Sham組(P<0.05或P<0.01)；Mod組、L-PHC組、H-PHC三組相比

5、升高程度依次為Mod組>L-PHC組>H-PHC組(P<0.05或P<0.01)。Mod組、L-PHC組、H-PHC組電鏡下觀察肝細胞線粒體均有不同程度的腫脹，線粒體膜和嵴有破壞。Mod組的損傷更明顯，發(fā)生空泡變性，粗面內質網、溶酶體和核糖體明顯減少，細胞核結構明顯破壞，而L-PHC組、H-PHC組肝細胞線粒體損傷較輕，并且有新生的線粒體，細胞核結構尚完整。H-PHC組與L-PHC組相比，肝細胞線粒體與粗面內質網等超微結構的損傷程度更輕