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1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)不同溫度條件下含氟碳液機(jī)器灌注保存供肝效果的比較,探討溫度對(duì)含氟碳液機(jī)器灌注保存供肝效果的影響,為含氟碳液機(jī)器灌注保存供肝尋找最適溫度。
方法:雄性wistar大鼠30只,隨機(jī)分成3組。對(duì)照組(10只):肝臟用4℃自制含氟碳液(配制方法見(jiàn)實(shí)驗(yàn)材料與方法)持續(xù)機(jī)器灌注保存8h,機(jī)器灌注流量為0.2ml·min-1·g-1。保存結(jié)束后行離體鼠肝循環(huán)再灌注(IPRL),灌注液為KH液,加入新鮮洗滌人紅細(xì)胞(紅細(xì)
2、胞比容為15%),充100%純氧,灌注速度為0.2ml·min-1·g-1,溫度控制在37℃,時(shí)間為60min。實(shí)驗(yàn)組1(10只):肝臟用10℃自制含氟碳液灌注保存,其它條件同對(duì)照組,然后行IPRL,方法同對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組2(10只):肝臟灌注溫度為16℃,其它保存條件與對(duì)照組相同,保存完成后行IPRL。各組于IPRL前在KH液中加入透明質(zhì)酸(HA)300ng/ml,分別于再灌注10min、30min和60min時(shí)分別采集灌注流入液2ml
3、和灌注流出液6ml,以測(cè)定丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、腫瘤壞死因子(TNF-α)含量和透明質(zhì)酸(HA)攝取量,離體鼠肝循環(huán)再灌注結(jié)束后,取少許肝左中葉組織分別在光學(xué)顯微鏡和電鏡下觀察肝細(xì)胞及肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。
結(jié)果:與對(duì)照組比較,實(shí)驗(yàn)組1和實(shí)驗(yàn)組2,ALT活性和TNT-α含量升高,HA攝取量下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)組2與實(shí)驗(yàn)組1相比,ALT活性和TNF-α含量也升高,HA攝取量下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)
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