抗稻瘟病的燼灰吸水鏈霉菌D-2變異菌株的產生及其應用研究.pdf

1、稻瘟病(Magnaporthgrisea)、紋枯病(Rhizoctonia.sonali)、白葉枯病(Xanthomonascampestrispv.oryzae)并稱水稻三大病害。其中，稻瘟病位列三大病害之首。其生理小種多樣化，遺傳變異快，分類多樣，有節(jié)瘟、穗頸瘟、葉瘟等類型。由于稻瘟病菌常在種子和稻桿上過冬，如前季水稻收割后，未能及時清除稻桿，就會給稻瘟病菌一個越冬場所，來年稻瘟病就有可能大面積爆發(fā)。稻瘟病菌的潛伏期在客觀上也使得在

2、癥狀能夠在大田鑒別認識時，稻瘟病可能已經開始流行。這些都給防治工作帶來了極大的困難。每年，稻瘟病都給世界水稻生產帶來嚴重損失，甚至顆粒無收。而傳統(tǒng)防治稻瘟病多采用化學農藥，但近年來，隨著對稻瘟病產生抗藥性的研究以及人們對環(huán)境保護的重視，可持續(xù)發(fā)展已經成為一個人們不得不面對的嚴峻問題。而生物農藥由于其具有低毒高效，選擇性強，低殘留甚至無殘留的特點，受到人們的廣泛重視。生物農藥中很大一部分是農用抗生素，而鏈霉菌產生的次生代謝產物又在農用抗生

3、素中占有重要地位，多種鏈霉菌次生代謝產物被研制成農用抗生素在生產上大力推廣，如井岡霉素、春雷霉素、中生菌素等在植物病蟲害防治方面取得的效果得到了大家的公認。本文針對稻瘟病這一嚴重危害水稻生產的世界性病害，從原有燼灰吸水鏈霉菌菌株的基礎上，通過誘變育種的方法，篩選到了比原始菌株防效更好的突變菌株，并進行了田間試驗，相關生物學活性，以及通過細胞學手段觀察其對稻瘟病菌絲致畸作用等研究，結果如下： 1.采用物理誘變法，化學誘變法和復合誘

4、變法對燼灰吸水鏈霉菌(Streptomycescinereohygroscopicus)原始菌株D-2孢子懸液進行誘變，獲得對稻瘟病(Magnaporthgrisea)抑制作用優(yōu)于原始菌株的兩個突變菌株，分別是用紫外線照射處理60s和DES(硫酸二乙酯)2％的濃度處理1.5h得到的菌株。這兩個突變菌株對西瓜枯萎病(Fusariumoxysporumf.spniveum)的抑制作用也要優(yōu)于原始菌株，其中DES(硫酸二乙酯)2％的濃度處理1

5、.5h得到的菌株對兩種病原菌的抑制作用都是最好的，抑菌帶寬度分別達18mm和8mm。 2.選用不同的溶劑和乳化劑，在不同的稀釋倍數下交叉配制成18種農藥，同時設農藥鐵菌和清水對照，進行小區(qū)田間試驗，結果表明：選用丙酮作溶劑，吐溫80作乳化劑，在稀釋倍數為50倍時配制的農藥和選用異丙醇作溶劑，吐溫80作乳化劑，在稀釋倍數為250時配制的農藥防效明顯優(yōu)于其它組合，其中，又以丙酮作溶劑，吐溫80作乳化劑，在稀釋倍數為50倍時配制的農藥

6、防效最好，防效達87.29％。在所有處理中，以丙酮為溶劑配制的農藥的防效要明顯優(yōu)于分別以異丙醇和甲苯為溶劑配制的農藥，且防效較穩(wěn)定，平均防效＞80％。其中，以丙酮為溶劑，吐溫80為乳化劑配制的農藥，防效＞80％，且病情指數＜0.4，穩(wěn)定性較好；以吐溫80為乳化劑配制的農藥的防效一般要優(yōu)于以農乳500+農乳600為乳化劑配制的農藥，防效大都在50％以上，病情指數＜0.5，而以農乳500+農乳600為乳化劑配制的農藥防效有高有低，病情指數也

7、不一致。以稀釋倍數作為研究對象時，發(fā)現在同一編號下的三個處理的防效多以稀釋50倍和稀釋100倍為最好，個別處理在稀釋250倍的情況下才表現出最佳防效。 3.從培養(yǎng)基種類，供氧條件，PH條件，培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間等幾個方面對誘變菌株的生物學特性進行了研究。結果表明：分別以NA作培養(yǎng)基，供氧量為40ml，PH為8，培養(yǎng)溫度為36℃，培養(yǎng)時間為48h培養(yǎng)時，誘變菌株的OD值達到最大，分別為0.237，0.132，0.271，0.076，

8、2.083。但其拮抗活性的表現與OD值的高低不太一致。拮抗活性大小依研究對象的不同而發(fā)生變化，以培養(yǎng)基作為研究對象時，LB＞PDA＞NA；以供氧條件作為研究對象時，40ml＞160ml；以PH值作為研究對象時，PH5＞PH7＞PH6，而OD值最到的PH8，基本不表現拮抗活性；以培養(yǎng)時間作為研究對象時，任何一個處理表現出較弱的拮抗活性；以培養(yǎng)溫度作為研究對象時，只有OD值最高的36℃這個處理表現出較強的拮抗活性。 4.采用電鏡掃描