Tristetraprolin在糖尿病腎病患者中的表達(dá)及其與尿蛋白的關(guān)系.pdf

1、背景
　　糖尿病腎?。╠iabeticnephropathy，DN）是糖尿病最常發(fā)生的微血管并發(fā)癥之一，在美國(guó)和歐洲已成為晚期腎臟疾病（end-stagerenaldisease，ESRD）的重要原因之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前我國(guó)糖尿病患者人數(shù)已超過(guò)9000萬(wàn)，且約31％-40％的糖尿病患者可能會(huì)進(jìn)展為糖尿病腎病，糖尿病腎病患者的健康及生活質(zhì)量大大降低，并給其家庭造成較大的經(jīng)濟(jì)、心理負(fù)擔(dān)。在糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制中，炎癥的作用日益受到重視。

2、腎臟固有細(xì)胞在病理狀態(tài)下可以產(chǎn)生多種炎性因子:TNF-α、IL-18、IL-6、NO等，這些炎癥因子相互作用，使得炎癥效應(yīng)的不斷擴(kuò)大。部分因子通過(guò)旁分泌和自分泌的方式，引起炎癥級(jí)聯(lián)放大反應(yīng)，因此，對(duì)糖尿病腎病炎癥反應(yīng)的發(fā)生及調(diào)控的研究顯得十分重要。有研究表明，活化的腎小球系膜細(xì)胞具有分泌白介素-18的能力，IL-18是參與炎癥反應(yīng)的重要炎性細(xì)胞因子，在炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)中起關(guān)鍵作用，IL18與糖尿病腎病的關(guān)系，可以考慮作為糖尿病腎病的早期腎損

3、害的標(biāo)記之一，但事實(shí)是否如此，尚需臨床數(shù)據(jù)進(jìn)一步證實(shí)。近來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)Tristetraprolin(TTP)是鋅指蛋白(ZFP36)RNA結(jié)合蛋白的CCCH型鋅指家族的原型成員，可通過(guò)與mRNA3'UTR區(qū)的AU富集區(qū)結(jié)合，進(jìn)而調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白的表達(dá)。許多炎癥因子如IL6、IL18等炎癥因子的mRNA都可與TTP結(jié)合，并被TTP降解。TTP是調(diào)節(jié)含有ARE的mRNA表達(dá)的RNA結(jié)合蛋白。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病存在微炎癥狀態(tài)，我們猜測(cè)糖尿病腎

4、病患者體內(nèi)可能存在TTP的表達(dá)異常，并試圖了解TTP在糖尿病腎病中的的表達(dá)與IL18的關(guān)系，觀察TTP在糖尿病腎病中的表達(dá)及其與尿蛋白的關(guān)系。
　　目的
　　本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)糖尿病腎病患者血、尿標(biāo)本中TTP與IL-18的表達(dá)變化趨勢(shì)及其與患者尿蛋白的關(guān)系，探討TTP作為糖尿病腎病早期腎損害的生物標(biāo)記的可能性。
　　方法
　　選取鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2013年1月至2013年12月實(shí)驗(yàn)對(duì)象共128例。其中健康組41例

5、，收集于體檢科相關(guān)檢測(cè)結(jié)果陰性的人群，單純糖尿病組33例，收集于內(nèi)分泌科，其余實(shí)驗(yàn)對(duì)象收集于腎內(nèi)科。所有實(shí)驗(yàn)對(duì)象男性65例，女性63例，患者年齡(60.7±10.9)歲。具體分組如下:1.正常對(duì)照組(Controlsubjects)（41例）收集于體檢科，年齡段選取與實(shí)驗(yàn)組一致。依據(jù)體檢陰性結(jié)果，選取對(duì)照人群。2.單純糖尿病組（T2DMNormoalbumiuria組）（尿白蛋白排泄率UAER＜30mg/24h，33例）3.糖尿病腎病微

6、量蛋白尿組（T2DMMicroalbuminuria組（微量蛋白尿組，30mg/24h≤UAER＜300mg/24h，29例）4.糖尿病腎病大量蛋白尿組（臨床蛋白尿組）(T2DMMacroalbuminuria，UAER≥300mg/24h，25例)。其中健康組為經(jīng)體格檢查及實(shí)驗(yàn)室檢查證實(shí)，單純糖尿病及糖尿病腎病組均為確診的2型糖尿病的患者，即空腹血糖大于7.0mmol/L，餐后2小時(shí)血糖大于11.1mmol/L,無(wú)急性并發(fā)癥，有或無(wú)蛋

7、白尿。
　　各組患者性別構(gòu)成、年齡、腎功能等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組患者血、尿標(biāo)本分別行PCR及ELISA法進(jìn)行檢測(cè)。上述實(shí)驗(yàn)均嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)及試驗(yàn)流程進(jìn)行。
　　結(jié)果
　　本研究共納入研究對(duì)象128例，其中男性65例，女性63例，平均年齡(60.7±10.9)歲。正常對(duì)照組、單純糖尿病組、微量蛋白尿組和大量蛋白尿組UAER分別為8.11±2.46mg/24h、9.18±2.67mg/24h、96.53±42.17mg/

8、24h和601.42±133.29mg/24h。尿沉渣電泳顯示TTP隨著尿蛋白的增加而降低，各組見(jiàn)兩兩比較顯示，大量蛋白尿組與微量蛋白尿組顯著低于單純糖尿組與正常對(duì)照組(P＜0.05)，而大量蛋白尿組與微量蛋白尿組兩者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。進(jìn)一步采用ELISA法檢測(cè)患者尿標(biāo)本Tristetraprolin，結(jié)果顯示微量蛋白尿組和大量蛋白尿組患者尿Tristetraprolin分別為148.47±20.33pg/ml和68.6

9、1±17.49pg/ml，顯著低于正常對(duì)照組（244.19±18.37pg/ml）和單純糖尿病組(160.03±19.41pg/ml)。同期對(duì)血標(biāo)本進(jìn)行ELISA法檢測(cè)Tristetraprolin，與尿標(biāo)本結(jié)果一致，與正常對(duì)照組（284.77±20.61pg/ml）和單純糖尿病組患者（196.14±17.11pg/ml）比較，微量蛋白尿組和大量蛋白尿組患者血漿Tristetraprolin水平降低，分別為140.53±19.22bpg

10、/ml和81.34±16.51pg/ml，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。為進(jìn)一步探索血尿Tristetraprolin與尿蛋白的關(guān)系，我們對(duì)二者進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果顯示糖尿病腎病患者血尿Tristetraprolin均與尿蛋白量呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.572(P＜0.05)和-0.685(P＜0.05)。血標(biāo)本單純糖尿病組與正常對(duì)照組比較，IL-18分別為（116.42±13.28pg/ml）和（105.37±17.16pg/