二羥黃酮對中度創(chuàng)傷性腦損傷后小鼠皮層神經元樹突的保護.pdf

1、南方醫(yī)科大學2 0 1 0 級碩士學位論文二羥黃酮對中度創(chuàng)傷性腦損傷后小鼠皮層神經元樹突的保護P r o t e c t i V ee f I ’e c t so f d i h y d r o x y n a V o n e o n n e u r o n a l d e n d r i t e si nc o r t e xa f ．t e rm o d e r a t et r a u m a t i c b r a i n i

2、n j u r y i nm i c e課題來源： I u P u I 自選課題學位申請人 趙姝導師姓名． 董為人，陳錦輝專業(yè)名稱 人體解剖與組織胚胎學培養(yǎng)類型 學術型培養(yǎng)層次 碩士所在學院 基礎醫(yī)學院2 0 14 年3 月2 2 日印第安納波利斯．廣州摘要方法：課題采用9 ．1 0 周齡的c 5 7 B L ／6 雄性小鼠，對其進行可控性皮層撞擊模型，將小鼠麻醉、固定、消毒后剪開頭項部皮膚，以前囟和后囟的連線、中縫和顳肌連線的交點為圓

3、心，2 m m 為半徑用牙科鉆鉆一個圈，在不傷及硬腦膜的前提下小心揭開顱帽；調整撞擊桿位置使其位于鉆開的圓圈正中，并接觸面垂直，設置速度為3 m ／s ，深度為1 ．O m m ，停留時間為O ．1 s ，此條件下的撞擊即可造成中度創(chuàng)傷性腦損傷，非手術組僅摘去顱帽，并不對皮層進行撞擊；小鼠被隨機分成4 組，分別為非手術組、手術組、治療組和實驗對照組，每組4只。造模后，分別于1 小時，2 4 小時，4 8 小時，7 2 小時給予治療組小鼠

4、腹腔注射二羥黃酮，由于二羥黃酮是以二甲基亞砜作為溶劑，而二甲基亞砜也被報道具有一定的神經保護作用，因此我們給另一組小鼠注射二甲基亞砜作為實驗對照組；最后一次注射2 4 小時后，取出小鼠的大腦，高爾基染色預處理后，用滑動切片機切片，切片厚度為2 0 0 “m ；切片用高爾基染色法染色并在顯微鏡下觀察拍照，選取皮層損傷區(qū)域邊緣起2 m m 區(qū)域，對皮層I I 、I I I 層所有錐體神● ，+經元樹突上串珠樣改變、樹突分支、樹突棘數(shù)目等進行

5、計數(shù)；另一方面，從行為學上檢測二羥黃酮對腦損傷模型小鼠的作用。共計9 0 只小鼠被隨機分配成4個組，每組1 5 到2 4 只，滾筒實驗分別在術前一天、術后三天、術后七天、術后十四天進行，記錄小鼠在滾筒上停留的時間用于評估小鼠損傷后的運動功能；術后第三周，對小鼠進行為期6 天的M o r r i s 水迷宮試驗，包括5 天的學習評估和最后1 天的記憶評估，記錄找到平臺的時間、游泳速度、最后一天在平臺所在象限停留的時間等指標用于評估小鼠損傷

6、后的學習記憶功能。一結果：l 、二羥黃酮對損傷后皮層神經元樹突串珠樣改變的影響：在創(chuàng)傷性腦損傷后，皮層的錐體神經元受到了損傷，不僅僅是單純的細胞死亡，存活下來的神經元也受到了影響，出現(xiàn)了樹突串珠樣改變。但是在治療組，串珠樣改變的程度明顯減輕。計數(shù)結果表明，對照組僅有少量的串珠樣改變( 1 9 ．7 8 士3 ．7 ／m m ) ，而手術組的小鼠串珠樣改變數(shù)目明顯增多( 3 7 ．5 8 士3 ．1 9 ／m m ) ，接近于對照組的兩倍