雌激素受體α基因多態(tài)性及啟動子區(qū)甲基化對兒童氟斑牙的影響.pdf

1、目的：
　　氟斑牙作為地方性氟中毒的特征性表現之一，對兒童危害深遠，研究發(fā)現并不是所有氟病區(qū)的兒童都罹患氟斑牙，可能存在遺傳易感性。本次研究通過分析ER基因多態(tài)性及啟動子區(qū)甲基化與兒童氟斑牙之間的關系，從遺傳學和表觀遺傳學方面探討氟斑牙發(fā)生機制，為從分子水平探討氟斑牙發(fā)生機制提供基本依據。
　　研究對象和方法：
　　1.研究對象的選擇:分別在河南省開封、通許兩地選擇高氟村和對照村作為調查點，高氟村平均水氟濃度為2.44

2、mg/L，對照村平均水氟濃度為0.37mg/L;隨機抽取所選調查點本地生長的8～12歲兒童作為調查對象，分別為高氟組和對照組，依據氟斑牙檢查結果將病區(qū)組又分為氟斑牙組和高氟區(qū)非患者組。其中氟斑牙組107人、高氟區(qū)非患者組100人及對照組78人，共285人。
　　2.氟斑牙的判定:由公共衛(wèi)生執(zhí)業(yè)醫(yī)師和口腔執(zhí)業(yè)醫(yī)師按照Dean's分級法判定。
　　3.血清鈣的測定采用火焰原子分光光度計法;尿氟檢測采用氟離子選擇電極法。
　

3、　4.雌激素受體α(ERα)基因rs3798577基因型分型采用Taqman探針法，Real-timePCR測定。
　　5.ER基因啟動子甲基化水平檢測采用Real-timePCR測定
　　6.本次實驗數據的錄入和分析均采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件，甲基化率經對數轉換之后符合正態(tài)分布，尿氟、血鈣經對數轉換后的甲基化率的分析均應用單因素方差分析和獨立樣本t檢驗;ERαrs3798577基因型和等位基因頻率在不同組別兒童中的分布

4、差異采用列聯表x2檢驗，OR值（比值比）和OR值的95％置信區(qū)間的計算采用Logistic回歸，所有檢驗都以α=0.05為檢驗水準，Hardy-Weinberg平衡狀況應用x2檢驗判定。
　　結果：
　　1.在外環(huán)境的檢測中，水氟濃度在兩組中分布差異有統(tǒng)計學意義。高氟組水氟濃度明顯高于對照組（t=-4.379，P＜0.05）。高氟組土壤中耕作層溶解氟和全氟明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（分別P＜0.05）。其他氟含量指標

5、如空氣中氟含量（未檢出），糧食中及蔬菜中氟含量，兩組之間差異無統(tǒng)計學意義(分別P＞0.05)，水中鈣含量，兩組之間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　2.高氟組兒童尿氟水平明顯高于對照組（F=-52.117，P＜0.001），高氟組尿氟超標兒童分布(71.0％)明顯高于對照組兒童(11.5％)（P＜0.05）;血鈣水平高氟組明顯低于對照組兒童(F=8.503，P＜0.001)。
　　3.ERαrs3798577基因型在不

6、同組別，不同性別和不同尿氟水平兒童間分布差異均無統(tǒng)計學意義（分別P＞0.05）。攜帶相同基因型不同組別兒童間血清鈣水平，高氟組明顯低于對照組（分別P＞0.05）。
　　4.不同組別、不同性別，不同氟斑牙分度，不同尿氟水平兒童間ERα基因啟動子甲基化率差異均無統(tǒng)計學意義（分別P＞0.05）;隨著氟斑牙嚴重程度的增高，兒童ERα基因啟動子甲基化率有逐漸增高的趨勢，在控制了尿氟變量之后，ERα基因啟動子甲基化率與血清鈣之間成負相關（r=

7、-0.162，P=0.034）。
　　結論：
　　1.研究未觀察到兒童氟斑牙與ERαrs3798577基因多態(tài)性有關。
　　2.氟病區(qū)兒童血清Ca水平的改變與氟暴露關系更為密切，而與ERα基因rs3798577多態(tài)性和該基因啟動子區(qū)甲基化聯系不密切。
　　3.ERα基因啟動子甲基化水平可能影響鈣的代謝，從而對兒童氟斑牙產生影響。
　　4.未發(fā)現ERα基因rs3798577多態(tài)性與該基因啟動子區(qū)甲基化交互作用