陽離子脂質體微泡超聲造影劑的制備及體外基因轉染初步研究.pdf

1、目的:制備一種常規(guī)超聲可實時觀測的陽離子脂質體微泡超聲造影劑，提供一個可實時觀測的載體，從而為攜基因微泡聯(lián)合超聲靶向治療提供一定的技術支持。
　　 方法:選用二軟脂酰卵磷脂（DPPC）、1，2-二油烯氧基-3-三甲氨基丙烷（DOTAP）和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（DSPE-PEG2000）三種脂質，以一定比例混合，使用薄膜分散法制備脂質體微泡超聲造影劑。在光鏡下觀察微泡形態(tài)，使用激光粒徑儀檢測微泡粒徑分布，同時使用

2、醫(yī)用超聲診斷儀對其體內外顯影效果進行觀察。體內顯影效果與商用超聲造影劑（聲諾維）進行對比，觀察其差異。通過DNA凝膠電泳實驗檢測自制脂質體微泡攜帶pGL3-control基因的能力，并對其體外細胞轉染效果進行初步分析。
　　 結果:以一定比例混合DPPC、DOTAP和DSPE-PEG2000為主要材料制備出的脂質體微泡的平均粒徑為6.969μm。超聲造影劑體內外顯影效果良好,體內大動脈顯影持續(xù)時間與聲諾維相比無統(tǒng)計學差異（p>0

3、.05）。DNA凝膠電泳實驗顯示自制陽離子脂質體微泡超聲造影劑有著較好的攜帶pGL3-control基因的能力，且攜帶能力明顯好于聲諾維，同時也發(fā)現(xiàn)聲諾維攜帶pGL3-control基因能力很弱。體外細胞實驗證實自制脂質體微泡明顯提高了pGL3-control在COS-7細胞內的轉染效率（p<0.01）。
　　 結論:自制陽離子脂質體微泡超聲造影劑具有良好的顯影及攜帶pGL3-control基因的能力，可以實現(xiàn)常規(guī)超聲下大動脈內