骨髓間質干細胞向肝細胞定向分化相關信號分子的分離與解析.pdf

1、干細胞定向誘導分化是當前干細胞研究領域的一個熱點問題。盡管人們在干細胞的定向誘導分化方面取得了一定的進展，但對體內(nèi)干細胞激活分化的機制仍知之甚少。若能深入了解干細胞在自然狀態(tài)或病理條件下的激活和分化機制，進而模擬體內(nèi)“微環(huán)境”(microenvironment)促使干細胞向人們期望的方向分化，或許是干細胞定向誘導分化技術發(fā)展的一條捷徑。人們在臨床觀察和動物實驗中發(fā)現(xiàn)，肝干細胞的出現(xiàn)大多發(fā)生在肝臟嚴重損傷或慢性肝臟疾病的狀態(tài)下。又有研究表

2、明，骨髓干細胞可向受損的肝臟遷徙，并具有向肝細胞橫向分化的可塑性。種種跡象表明，肝臟的損傷似乎是骨髓干細胞在體內(nèi)橫向分化為肝細胞的一個重要前提，而肝內(nèi)或肝外干細胞的激活信號很可能源于損傷的肝臟。我們在前期的研究中通過細胞交叉移植實驗也發(fā)現(xiàn)，外源性卵圓細胞在肝臟內(nèi)的特異性定位是受某種“信號分子”的引導所致。這種“信號分子”極可能產(chǎn)生于受損的肝臟，釋于血液循環(huán)，對骨髓干細胞和肝卵圓細胞的激活和誘導分化可能起著十分重要的作用?；谝陨贤普?，我

3、們以肝損傷模型大鼠的肝組織萃取物作為誘導刺激物，構建了骨髓間質干細胞的體外誘導分化體系，成功實現(xiàn)了由骨髓間質干細胞向肝細胞的定向分化。在這一實驗體系中，可以實現(xiàn)骨髓間質干細胞由“未決定狀態(tài)”(undetermined)向“決定狀態(tài)”(determined)的轉變，促使其向肝細胞方向分化。該實驗體系不僅清晰地展現(xiàn)了骨髓間質干細胞從早期分化方向的決定到肝細胞終末分化的各個階段，也進一步證明了我們先前的假設，即，肝干細胞的激活信號很可能源于損

4、傷的肝臟。然而，損傷狀態(tài)下的肝臟究竟包含了何種“信息分子"?這些"信息分子"和肝臟干細胞的激活、分化究竟有何種聯(lián)系?若能進一步探明這些問題，對于深入理解干細胞定向分化的機制無疑具有十分重要的意義。本研究擬采用蛋白質芯片飛行時間質譜(SELDI-TOF-MS)技術對肝損傷模型大鼠肝組織萃取物和正常大鼠肝組織萃取物的蛋白質表達譜進行比較分析，試圖找出兩者之間存在的差異表達蛋白，確定與骨髓間質干細胞向肝細胞定向分化相關的信號分子，為進一步深入