慢性間斷性缺氧致大鼠認知功能障礙及機制研究.pdf

1、目的：復制大鼠慢性間斷性缺氧(CIH)模型，通過觀察CIH過程中大鼠認知功能的變化、前額葉皮層和海馬神經元組織學改變以及膽堿能系統的改變，探討CIH致大鼠認知障礙與相關腦區(qū)神經元組織學及膽堿能系統改變的關系，為進一步闡明阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征(OSAS)導致認知功能障礙的機制提供實驗性依據。 方法：選取成年雄性SD大鼠(體重約250±20g)40只，隨機均分為4組：對照組、慢性間斷性缺氧1周(CIH1w)組、慢性間斷性缺氧3周

2、(CIH3w)組和慢性間斷性缺氧5周(CIH5w)組。各組大鼠均常規(guī)飼養(yǎng)。CIH各組大鼠每日放入自制的缺氧艙內缺氧8小時，分別連續(xù)缺氧1周、3周和5周；應用Morris水迷宮定位航行實驗和空間搜索實驗觀察對照組和CIH各組大鼠學習記憶功能的變化；利用HE染色在光學顯微鏡下對前額葉皮層和海馬組織學改變進行觀察；利用免疫組織化學方法顯示前額葉皮層和海馬膽堿乙酰轉移酶(ChAT)和煙堿型乙酰膽堿受體α4(nAChRa4)陽性細胞表達，應用Im

3、age-Pro plus 6.0分析系統進行定量分析，結果用光密度(OD)值表示。計量實驗數據用SPSS12.0統計軟件進行統計學分析。 結果： 1．Morris水迷宮測試：①定位航行實驗(水下平臺)：各組大鼠逃避潛伏期隨實驗天數增加而逐漸縮短，不同天數間比較，逃避潛伏期有明顯差異(P<0.05)。與對照組比較，CIH1w組和CIH3w組大鼠逃避潛伏期延長，但差異無顯著性(P>0.05)；CIH5w組大鼠逃避潛伏期明顯延

4、長，差異具有顯著性(P<0.05)。CIH各組逃避潛伏期隨著缺氧時間延長呈逐漸延長趨勢；與CIH1w組和CIH3w組比較，CIH5w組逃避潛伏期差異具有顯著性(P<0.05)。②空間搜索實驗：與對照組比較，CIH1w組和CIH3w組大鼠在原有平臺所在中環(huán)停留時間減少，但差異無顯著性(P>0.05)；CIH5w組大鼠在中環(huán)停留時間明顯減少，差異具有顯著性(P<0.05)。CIH各組大鼠在原有平臺所在中環(huán)停留時間隨缺氧時間延長呈逐漸減少趨勢

5、，各組間比較僅CIH1w組與CIH5w組差異具有顯著性(P<0.05)。CIH各組大鼠在原有平臺第四象限停留時間隨缺氧時間延長呈逐漸減少趨勢，但與對照組比較及CIH各組間比較均無顯著性差異(P>0.05)。 2．前額葉皮層和海馬神經元組織學改變：與對照組比較，CIH大鼠前額葉皮層和海馬變性壞死神經元增多，并且隨著缺氧時間延長，上述改變呈逐漸加重趨勢。 3．ChAT在前額葉皮層和海馬的陽性表達結果：ChAT陽性表達定位于胞

6、漿中，呈棕黃色顆粒狀。各組均有ChAT陽性表達細胞。與對照組比較，CIH1w組前額葉皮層和海馬ChAT陽性表達減少，但差異無顯著性(P>0.05)；CIH3w組和CIH5w組前額葉皮層和海馬ChAT陽性表達明顯減少，差異具有顯著性(P<0.05)。CIH各組前額葉皮層和海馬ChAT陽性表達隨缺氧時間延長呈逐漸下降趨勢；組間比較提示，CIH3w組比CIH1w組海馬ChAT陽性表達顯著減少，CIH5w組比CIH1w組前額葉皮層和海馬ChAT

7、陽性表達均顯著減少(P<0.05)。 4．nAChRa4在前額葉皮層和海馬的陽性表達結果：nAChRa4陽性表達呈棕黃色，主要定位于細胞膜上，胞漿中也有少量表達。各組均有nAChRa4陽性表達細胞。與對照組比較，CIH1w組和CIH3w組前額葉皮層和海馬nAChRa4陽性表達減少，但差異無顯著性(P>0.05)；CIH5w組前額葉皮層和海馬nAChRa4陽性表達明顯減少，差異具有顯著性(P<0.05)。CIH各組前額葉皮層和海馬