阿德福韋酯抗乙肝病毒的免疫效應(yīng)研究.pdf

1、 本研究分三個(gè)部分：一、體外培養(yǎng)人外周血白細(xì)胞中阿德福韋酯誘生干擾素的作用研究；二、阿德福韋酯對(duì)慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ和IL-4水平的影響；三、阿德福韋酯和拉米夫定對(duì)慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ和IL-4水平的對(duì)照研究。 一、體外培養(yǎng)人外周血白細(xì)胞中阿德福韋酯誘生干擾素的作用研究 目的觀察阿德福韋酯對(duì)慢性乙型肝炎(CHB)患者和健康人體外培養(yǎng)的外周血白細(xì)胞(WBC)作用后，培養(yǎng)上清中干擾素活性的動(dòng)態(tài)變化

2、，探討阿德福韋酯是否能誘導(dǎo)WBC產(chǎn)生干擾素。方法抽取20名CHB患者和20名健康人的外周血，將白細(xì)胞放入有不同濃度阿德福韋酯(5μg/ml、7.5μg/ml、10μg/ml及無藥對(duì)照組)的培養(yǎng)液中，分別于24、48及72小時(shí)三個(gè)時(shí)間點(diǎn)利用微量細(xì)胞病變抑制法(CPE)測定培養(yǎng)液中IFN的效價(jià)。結(jié)果健康人組中，24小時(shí)點(diǎn)三組均高于無藥對(duì)照組(P＜0.001)，其中5μg/ml組72小時(shí)點(diǎn)與24小時(shí)點(diǎn)比有明顯升高(P＜0.001)；CHB病人

3、組中，各時(shí)間點(diǎn)不同濃度阿德福韋酯組與對(duì)照組無差異；結(jié)論阿德福韋酯有一定誘生正常人WBC分泌干擾素的作用，而對(duì)慢性乙肝患者的WBC則此作用不明顯。 二、阿德福韋酯對(duì)慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ和IL-4水平的影響 目的觀察阿德福韋酯治療前后慢性乙型肝炎患者外周血清IFN-γ和IL-4水平的變化，探討阿德福韋酯抗乙肝病毒免疫效應(yīng)的機(jī)制。方法108例CHB均為參加隨機(jī)、雙盲、對(duì)照、多中心阿德福韋酯Ⅲ期臨床試驗(yàn)中服用阿德福韋酯

4、的患者，用雙抗體夾心ELISA法檢測治療前，治療后4、12、24及48周末患者血清中IFN-γ和IL-4的水平，同時(shí)用實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的血清HBVDNA。結(jié)果CHB患者ALT和AST在治療12周后明顯下降，到24周末達(dá)到正常范圍，并持續(xù)到治療結(jié)束；HBVDNA在4周末明顯低于治療前(P＜0.05)，并持續(xù)下降至治療結(jié)束IFN-γ和IL-4水平逐漸上升，在24周末及48周末與治療前相比有顯著差異(P＜0.001

5、)。結(jié)論阿德福韋酯抗病毒治療后使機(jī)體免疫部分恢復(fù)或增強(qiáng)，這種作用可能是隨著由于治療引起的病毒負(fù)載下降和CD4+T淋巴細(xì)胞活性的重建而出現(xiàn)的。 三、阿德福韋酯和拉米夫定對(duì)慢性乙型肝炎患者IFN-γ和IL-4的對(duì)照研究 目的觀察阿德福韋酯和拉米夫定治療前后慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血清IFN-γ和IL-4的變化，對(duì)照觀察兩種核苷類似藥物抗乙肝病毒的免疫效應(yīng)。方法214例CHB均為參加阿德福韋酯Ⅲ期臨床試驗(yàn)的患者，用實(shí)時(shí)熒

6、光聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測治療前、治療后4、12、24及48周末患者血清HBVDNA，其中40例患者利用雙抗體夾心ELISA法檢測相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的血清中IFN-γ和IL-4的水平。結(jié)果慢性乙肝病人ALT和AST治療后兩組間改善值基本相同；HBVDNA改善值拉米夫定(LVD)組從4周末起明顯高于阿德福韋酯(ADV)組(P＜0.05)，在48周末兩組改善值基本相同；LVD組IFN-γ水平在12周末達(dá)到高峰，而ADV組在48周末IFN-γ水平才