抗乙肝病毒雞卵黃免疫球蛋白的分離、提純.pdf

1、近年來(lái)，人們已越來(lái)越認(rèn)識(shí)到卵黃是抗體生產(chǎn)的一種重要來(lái)源，并且雞卵黃免疫球蛋白(IgY)在作為免疫檢測(cè)試劑、生化檢測(cè)試劑及口服防治疾病的抗體方面，具有許多哺乳動(dòng)物產(chǎn)生的抗體所無(wú)法比擬的優(yōu)點(diǎn)。因此，目前已經(jīng)成功的建立了多種IgY分離純化的方法。但是，IgY還仍然未作為理想試劑和藥物得到廣泛應(yīng)用，主要原因在于從卵黃中分離純化IgY工藝復(fù)雜、耗時(shí)，且費(fèi)用較高，不適于大規(guī)模生產(chǎn)。本論文首次采用乙肝疫苗作為免疫原免疫產(chǎn)蛋雞，獲得了抗乙肝病毒IgY抗

2、體，所提取的抗乙肝病毒IgY經(jīng)ELISA測(cè)定顯示出較強(qiáng)的與抗原結(jié)合的活性。并且摸索出一條簡(jiǎn)便可行的分離純化IgY的方法。 經(jīng)過(guò)研究發(fā)現(xiàn)：將卵黃液用pH=5的鹽酸水溶液稀釋10倍，靜置6小時(shí)后離心分離，取上清液，然后分別用飽和度為55％和33％的(NH4)2SO4進(jìn)行鹽析，粗提后的組分經(jīng)SephadexG150凝膠柱層析。使用含有0.14mol/LNaCl的pH=7.0，0.02mol/L的NaH2PO4-Na2HPO4緩沖液作為