七氟烷后處理對(duì)老年大鼠缺血心肌線(xiàn)粒體ATP敏感性鉀通道和細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：本研究擬從器官水平上觀察七氟烷后處理對(duì)老年大鼠缺血心臟功能和梗死面積的影響。從分子水平上研究七氟烷后處理對(duì)老年大鼠缺血心肌線(xiàn)粒體敏感性鉀通道和細(xì)胞凋亡的影響。
　　方法：96只老年Sprague Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為8組(n=12):假手術(shù)組（Sham組），缺血/再灌注組（I/R組），七氟烷后處理Ⅰ(SevoⅠ，0.5MAC Sevo后處理)組，七氟烷后處理Ⅱ（SevoⅡ，1.0 MAC Sevo后處理）組，5-

2、羥基癸酸鹽(5-HD)組，七氟烷后處理Ⅰ+5-hydroxydecanoate(SevoⅠ+5-HD)組，七氟烷后處理Ⅱ+5-HD(SevoⅡ+5-HD)組，二甲基亞砜(DMSO，Dimethyl Sulfoxide)組。采用離體心臟Langendorff灌注模型，除Sham組持續(xù)灌注135min，其余各組平衡灌注20min后，停灌25min，復(fù)灌90min。在再灌注90min中，除Sham、I/R組外，其余各組在再灌注初期的15min

3、采用藥物后處理，然后再灌注不含藥的K-H液75分鐘。記錄平衡末(Preischemia)及再灌注5min、15min、30min、60min、90min時(shí)的心率（HR,Heart rate）、左室內(nèi)壓上升最大速率(+dp/dtmx)、左室內(nèi)壓下降最大速率(-dp/dtmax)、左室發(fā)展壓(LVDP, Left Ventricular Developing Pressure)、左室舒張末期壓(LVEDP,Left Ventricular

4、end-Diastolic Pressure)、冠脈流量(CF, Coronary flux)。灌注結(jié)束時(shí)，TTC(Triphenyl Tetrazolium Chloride)法染色并計(jì)算心肌梗死面積百分比;提取心肌線(xiàn)粒體，電鏡下觀察線(xiàn)粒體形態(tài)并采用Flameng線(xiàn)粒體半定量分析法進(jìn)行計(jì)分;采用Western blot半定量測(cè)定線(xiàn)粒體Bcl-2/Bax和Cyt-C的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：與缺血/再灌注組比較，兩七氟烷后處理組能顯

5、著提高老年大鼠缺血心臟的冠脈流量，兩組的各項(xiàng)心功能指標(biāo)均高于缺血/再灌注組，心肌線(xiàn)粒體形態(tài)保存較好(p＜0.05);兩組的心肌梗死面積也小于缺血/再灌注組(p＜0.05)。高濃度的七氟烷后處理組心功能指標(biāo)明顯好于低濃度的七氟烷后處理組(p＜0.05)。但聯(lián)合應(yīng)用mito KATP通道抑制劑5-HD后，七氟烷后處理組的保護(hù)效應(yīng)消失(p＜0.05)。與缺血/再灌注組比較，七氟烷后處理組Bax/Bcl-2和Cyt-C的表達(dá)較少;聯(lián)合應(yīng)用5-H

6、D后，七氟烷后處理抗凋亡作用消失(p＜0.05)。
　　結(jié)論：七氟烷后處理可增加老年大鼠缺血心臟的冠脈流量，減少梗死面積，促進(jìn)缺血心肌功能恢復(fù)，減輕缺血再灌注對(duì)心肌細(xì)胞線(xiàn)粒體的損傷，抑制心肌細(xì)胞凋亡。而mito KATP(Mitochondrial ATP-sensitive potassium channel)通道抑制劑5-HD可以取消七氟烷后處理對(duì)老年大鼠缺血心肌的保護(hù)作用。由此推論:mito KATP的開(kāi)放在七氟烷后處理保護(hù)