磁場結(jié)合順鉑對腫瘤細胞K562殺傷效應(yīng)機制的初步研究.pdf

1、目的：研究穩(wěn)恒磁場聯(lián)合順鉑對K562細胞殺傷作用的機制；用免疫印跡(western blotting)檢測磁場處理前后K562細胞Cyclin B1表達量的變化。 方法： 1．MTT 法檢測順鉑聯(lián)合磁場對K562細胞(人紅白血病細胞)活性的改變。 2．磁場聯(lián)合順鉑作用于K562細胞后，通過光學(xué)顯微鏡、原子力顯微鏡觀察細胞形態(tài)的變化；流式細胞儀分析檢測細胞周期分布的變化；單細胞凝膠電泳(SCGE)檢測細胞 DNA的

2、損傷。 3．用western blotting檢測同步化K562細胞各周期時相中Cyclin B1的變化趨勢； 4．磁場處理K562細胞后，用western blotting檢測CyclinB1蛋白含量的變化。 結(jié)果： 1．K562細胞以1×10<'5>cells/mL 的細胞密度接種，MTT 檢測結(jié)果表明，磁場聯(lián)合10μg/mL順鉑處理K562細胞12h后，細胞活性受到顯著抑制。 2．磁場聯(lián)合1

3、0μg/mL順鉑處理K562細胞12h后，光學(xué)顯微鏡觀察細胞形態(tài)發(fā)現(xiàn)，磁場聯(lián)合順鉑組細胞碎片較多。原子力顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，磁場聯(lián)合順鉑組細胞表面出現(xiàn)較大的孔洞。流式細胞儀檢測細胞周期分布發(fā)現(xiàn)，磁場可將細胞阻滯于G2／qVl期；順鉑可將細胞阻滯于S期；順鉑聯(lián)合磁場處理細胞12h后，大部分細胞被阻滯于S期。SCGE檢測的結(jié)果表明，磁場協(xié)同順鉑作用于K562細胞可以增加細胞DNA的損傷。原子力顯微鏡觀察磁場與順鉑共同作用于K562細胞后，其DN

4、A的結(jié)構(gòu)變化，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合處理組DNA交聯(lián)及斷裂均增加。 3．用western blotting檢測Cyclin B1蛋白的周期變化，結(jié)果表明，K562細胞Cyclin B1從S期初期開始表達，隨后逐步升高，在G2/M期達到最高點，進入M期后迅速降低。 4．磁場分別處理K562細胞12h、24h、36h后，用western blotting檢測CyclinB1含量變化，發(fā)現(xiàn)磁場處理組與對照組相比，Cyclin B1蛋白表達量