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文檔簡介
1、目的:探討穿心蓮對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子表達(dá)的影響及機(jī)制研究。
方法:產(chǎn)科手術(shù)室取健康新生兒臍帶(無菌條件下),用胰酶消化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,并進(jìn)行原代培養(yǎng)及細(xì)胞傳代。選擇第三代細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,使用免疫熒光鑒定內(nèi)皮細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)一共分成5組,每個組設(shè)6個復(fù)孔:
(1)、空白對照組,僅給予M199基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞24小時。
(2)、氧化修飾的脂蛋白(ox-LDL)組。
(3)、ox-LDL+A
2、P50mg/L組。
(4)、ox-LDL+AP100mg/L組。
(5)、ox-LDL+AP200mg/L組。
37攝氏度溫箱培養(yǎng)48小時后取上清、離心;用ELISA試劑盒檢測ICAM-1、VCAM-1、E-選擇素蛋白濃度;用胰酶進(jìn)行消化并收集各組的細(xì)胞,采用流式細(xì)胞術(shù)測定內(nèi)皮細(xì)胞表面抗原CD40/CD40L表達(dá)的平均免疫熒光強(qiáng)度。
結(jié)果:與對照組相比,ox-LDL組可促進(jìn)粘附分子VCAM-1、I
3、CAM-1、E-選擇素蛋白及CD40、CD40L的表達(dá),P<0.01;與ox-LDL組相比,低濃度的穿心蓮內(nèi)酯(50mg/L)對粘附分子VCAM-1、ICAM-1、E-選擇素蛋白及CD40、CD40L的表達(dá)無明顯影響,P>0.05;而中、高濃度的穿心蓮內(nèi)酯(100mg/L、200mg/L)對粘附分子VCAM-1、ICAM-1、E-選擇素蛋白及CD40、CD40L的表達(dá)有抑制作用,P<0.01,其中高濃度的穿心蓮內(nèi)酯抑制作用更明顯,P<0
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