腦復聰對LPS激活的小膠質細胞合成環(huán)氧合酶-2和分泌前列腺素E2作用的實驗研究.pdf

1、[目的]
　　 觀察中藥腦復聰含藥血清對脂多糖激活后的小鼠神經(jīng)小膠質細胞BV-2的形態(tài)、BV-2中COX-2蛋白的表達以及BV-2上清液中PGE2分泌量水平的影響。
　　 [方法]
　　 將體外培養(yǎng)的小鼠神經(jīng)小膠質細胞BV-2分成:正常對照組、LPS組(終刺激濃度1μg/ml)、高、中、低劑量腦復聰(NFC)含藥血清組,培養(yǎng)24h,用倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài),蛋白印跡方法檢測BV-2中COX-2蛋白的表達,酶聯(lián)

2、免疫吸附法測定培養(yǎng)BV-2上清液中PGE2蛋白的濃度。
　　 [結果]
　　 1、BV-2細胞的形態(tài):
　　 通過倒置相差顯微鏡觀察:正常組BV-2細胞大約70-80％貼壁良好,胞體呈三角狀、桿狀或梭狀,大約20-30％懸浮；1μg/ml LPS刺激24h后BV-2約有10-20％貼壁,80-90％懸浮,大多數(shù)細胞聚集成團,有的胞體變?yōu)閳A形。NFC高、中、低劑量含藥血清組貼壁細胞數(shù)量較LPS組增多,對LPS所致的

3、形態(tài)變化有一定的恢復作用。
　　 2、BV-2中COX-2蛋白的表達:
　　 采用蛋白印跡方法檢測,結果顯示:LPS組BV-2中COX-2蛋白含量較正常對照組升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；與LPS組相比,NFC含藥血清各劑量(高、中、低劑量)組BV-2中COX-2蛋白含量均下降,差異顯著(P<0.01)。
　　 3、BV-2上清液中PGE2蛋白的濃度:
　　 采用酶聯(lián)免疫吸附方法檢測BV-2上

4、清液中PGE2含量,結果顯示:LPS組較正常對照組BV-2上清液中PGE2含量升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；與LPS組相比,NFC各劑量(高、中、低劑量)含藥血清組含量均下降,差異顯著(P<0.01)。
　　 [結論]
　　 NFC含藥血清可以顯著下調脂多糖激活后BV-2中COX-2蛋白的表達量并顯著減少BV-2上清液中PGE2的分泌量。
　　 [創(chuàng)新點]
　　 體外培養(yǎng)小鼠神經(jīng)小膠質細胞BV