神經(jīng)節(jié)苷脂對一氧化碳中毒后大鼠少突膠質(zhì)細胞Nogo-A的影響.pdf

1、大連醫(yī)科大學碩士學位論文神經(jīng)節(jié)苷脂對一氧化碳中毒后大鼠少突膠質(zhì)細胞NogoA的影響姓名：耿韋韋申請學位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學指導教師：王蘇平20090601神經(jīng)節(jié)苷脂是一種含唾液酸的糖神經(jīng)鞘脂類竊著，是人類細胞膜的組成成份，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量尤其豐富。通常根掘唾液酸數(shù)目的不同分為GM(單唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂)GD(二唾液酸神經(jīng)節(jié)一脂)和GT(三唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂)等。又根據(jù)糖基數(shù)目不同將GM分為TiM1(含4個糖基)、GM2(含3個糖基)

2、、GM3(含2個糖基)。神經(jīng)節(jié)苷胎具有豐富的生物學功能，如維持細胞膜結構的穩(wěn)定：作為細胞標記和抗原參與細胞細胞間相互作用和識別；作為分化標志，參與細胞生長調(diào)節(jié)和：言息傳遞；作為某些生物活性物質(zhì)的受體，影響細胞質(zhì)膜蛋白的功能及參與細胞粘附等。大量實驗研究結果表明，神經(jīng)節(jié)苷質(zhì)類物質(zhì)能調(diào)節(jié)與神經(jīng)元膜有關的神經(jīng)功能，特別是對神經(jīng)組織分化成熟和神經(jīng)組織損傷后有明顯促進作用；其中單唾液酸四已糖神經(jīng)節(jié)苷脂(GM1)對神經(jīng)元有明顯的保護作用。GMl是最

3、重要的神經(jīng)節(jié)苷脂之一，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變的治療中起重要作用，在神經(jīng)發(fā)生，生長及分化中起必不可少的作用。外源性GMl可能過血腦屏障進入中樞神經(jīng)系統(tǒng)并整合到神經(jīng)細胞膜發(fā)揮作用。GMl對中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷具有明顯的修復作用。GMl對CO中毒所致的少突膠質(zhì)細胞損害是否有保護作用，其作用是否與少突膠質(zhì)細胞上NogoA蛋白有關目前尚無報道，本實驗擬在細胞水平對此加以探討。方法：(1)取新生2天SD大鼠的視神經(jīng)，采用組織塊培養(yǎng)法，用DMEM／Fl2化學

4、限定培養(yǎng)液培養(yǎng)、純化少突膠質(zhì)細胞。細胞免疫化學檢測少突膠質(zhì)細胞髓鞘堿性蛋白(Myelinbasicprotein，MBP)表達，鑒定少突膠質(zhì)細胞，并計算陽性率。(2)在排除缺氧的影響下，1％CO處理少突膠質(zhì)細胞，采用RTPCR及細胞免疫組化觀察6h、24h、48h少突膠質(zhì)細胞NogoAmRNA及其蛋白表達。(3)在培養(yǎng)液中預先加入GMl，1％CO處理少突膠質(zhì)細胞，檢測NogoAmRNA及其蛋白的表達。結果：。1、組織塊24h開始貼壁，4