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文檔簡介
1、 本實驗室在前面的研究中利用熒光差異顯示RT-PCR(FDDRT-PCR)技術研究了大鼠急性腦缺血中缺血與非缺血腦區(qū)差異表達的基因。其中有一條在缺血區(qū)上調較明顯，經(jīng)克隆測序和同源性分析后發(fā)現(xiàn)該基因與人和小鼠KIAA0280基因相似性較高，因而將其命名為大鼠KIAA0280基因?！ 樘剿鞔笫驥IAA0280是否參與缺血性腦損傷的病理生理過程并發(fā)揮作用，以及其機制。本研究首先利用MCAO模型，在mRNA水平確認了大鼠KIAA0280在
2、缺血區(qū)的上調表達，經(jīng)序列比對推測己報道的小鼠mKIAA0280序列有誤并在WesternBlot檢測中得到證實；從蛋白水平分析了大鼠KIAA0280在正常雌性大鼠中的組織表達譜，發(fā)現(xiàn)該蛋白在正常大鼠的胰腺、胸腺、大腦皮層、小腦等組織表達量較高，而在腎、小腸、胃等組織則表達量較低；構建了真核表達載體pcDNA3.1(-)-KIAA0280，并利用脂質體轉染法將其轉染至PC12細胞，建立了穩(wěn)定表達的細胞系，為以后的功能研究奠定了良好的基礎。
3、 第1章大鼠KIAA0280cDNA的克隆及其表達研究 結論:大鼠KIAA0280可能參與了腦缺血的病理生理過程；推測小鼠mKIAA0280報道序列有誤；KIAA0280在大鼠胸腺、大腦皮層、小腦、胰腺等組織表達量較高。 第2章pcDNA3.1(-)-KIAA0280真核表達載體的構建及其在PC12穩(wěn)定表達細胞株的建立 驗證了大鼠KIAA0280基因的存在和表達，但其功能并未得到證實。本研究擬構建該基因的重組表達載體
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