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文檔簡(jiǎn)介
1、虹鱒(Oncorhynchus mykiss)是世界上養(yǎng)殖范圍最廣的名貴魚類。為了更好地認(rèn)識(shí)虹鱒的染色體特征,豐富冷水性魚類的細(xì)胞遺傳學(xué)內(nèi)容,為其遺傳、變異、分類、系統(tǒng)演化以及雜交育種提供科學(xué)依據(jù),本文對(duì)虹鱒染色體多重顯帶技術(shù)進(jìn)行了詳細(xì)的研究。
采用腎細(xì)胞體內(nèi)培養(yǎng)法或淋巴細(xì)胞培養(yǎng)法制備虹鱒的染色體。對(duì)其腎細(xì)胞染色體數(shù)目統(tǒng)計(jì)分析表明,虹鱒染色體組有60條染色體,核型公式為2n=34m+10sm+16t,染色體總臂數(shù)(NF)為10
2、4。最長(zhǎng)染色體的相對(duì)長(zhǎng)度為6.03,最短染色體的相對(duì)長(zhǎng)度為2.15,長(zhǎng)度比為2.80。采用流式細(xì)胞分析儀,測(cè)定了虹鱒的DNA含量,與雞血細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照相比為1.59±0.23,以雞紅細(xì)胞DNA含量2.3 pg.N-1計(jì),則虹鱒體細(xì)胞絕對(duì)DNA含量為3.65pg.N-1。與鮭形目其他科的四倍體魚類比較,虹鱒的染色體數(shù)眉和DNA含量具有相似性,體現(xiàn)出四倍體特征。
經(jīng)過C顯帶處理,虹鱒染色體除呈現(xiàn)傳統(tǒng)的著絲粒區(qū)、近著絲粒粒區(qū)、中間區(qū)和
3、末端區(qū)外,還發(fā)現(xiàn)某些染色體全部出現(xiàn)C帶及部分染色體出現(xiàn)可變帶。在分析比較虹鱒不同的染色體C帶中期相時(shí),發(fā)現(xiàn)有些部位的C帶會(huì)出現(xiàn)顯色的改變,有時(shí)呈陰性帶,有時(shí)呈陽性帶。同源染色體的C帶的大小、位置及著色強(qiáng)度基本相同,不同染色體的C帶有一定差異。中部著絲點(diǎn)染色體均在著絲粒部位處深染。虹鱒的染色體C帶類型多為著絲粒C帶,多數(shù)染色體的著絲點(diǎn)區(qū)均顯示出一個(gè)深淺不同的C帶。
用修改的G顯帶技術(shù),進(jìn)行GTG帶紋的顯示,虹鱒魚每條染色體上都能
4、清晰的顯出G帶,G陽性帶對(duì)應(yīng)于AT含量豐富的區(qū)域,可見虹鱒染色體上AT序列比較密集,經(jīng)G顯帶技術(shù)處理后,87%的染色體區(qū)域呈現(xiàn)陽性染色。
用銀染技術(shù)處理后發(fā)現(xiàn)虹鱒的NORs位于第1號(hào)染色體和第13號(hào)染色體的長(zhǎng)臂上,數(shù)目為4個(gè)。
在DNA復(fù)制的不同時(shí)期,復(fù)制帶隨之變化,在DNA復(fù)制的不同時(shí)期,同一條染色體的形態(tài)隨著DNA的復(fù)制不斷變化。染色體的形態(tài)是動(dòng)態(tài)變化的。
應(yīng)用熒光原位雜交技術(shù)(FISH),將虹鱒生長(zhǎng)激
5、素基因準(zhǔn)確定位在染色體上。目前檢測(cè)到生長(zhǎng)激素基因位于2對(duì)頂端著絲粒類型的染色體上。本實(shí)驗(yàn)將雜交信號(hào)和染色體同時(shí)顯示,并且在復(fù)染的同時(shí)結(jié)合染色體分帶技術(shù),可以精確的進(jìn)行基因定位。與經(jīng)濟(jì)效益密切相關(guān)的QTL基因的FISH定位是我們以后研究的重點(diǎn)。
虹鱒染色體被CMA3熒光染色后,用B(藍(lán)色激發(fā)光)激發(fā)時(shí),發(fā)現(xiàn)NORs區(qū)呈現(xiàn)明亮的熒光。虹鱒魚長(zhǎng)臂處具有4個(gè)大小約相等的Ag-NORs,經(jīng)CMA3染色,長(zhǎng)臂處具有大小相差約3-4倍的4個(gè)
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