腺病毒介導的hING4基因聯(lián)合持續(xù)低劑量率γ射線照射治療胰腺癌的體外實驗研究.pdf

1、蘇州大學碩士學位論文腺病毒介導的hING4基因聯(lián)合持續(xù)低劑量率γ射線照射治療胰腺癌的體外實驗研究姓名：田玥申請學位級別：碩士專業(yè)：影像醫(yī)學與核醫(yī)學指導教師：蘇成海20080501。腺病毒介導的hlNG4基因聯(lián)合持續(xù)低劑量率Y射線照射治療胰腺癌的體外實驗研究中文摘要AdhlNG4基因能在Pane1細胞中成功轉(zhuǎn)錄。(2)用AdhlNG4和AdGFP感染人胰腺癌細胞pane1，在倒置顯微鏡和熒光顯微鏡下觀察熒光表達情況及抑制細胞生長的作用在熒

2、光顯微鏡下觀察熒光表達，90％的細胞都表達GFP；AdhlNG4和AdGFP均呈現(xiàn)很高的感染效率：在熒光倒置顯微鏡下觀察AdhlNG4處理的Pane1細胞，出現(xiàn)明顯變圓、脫落、皺縮等病變，表明AdhlNG4對Pane1胰腺癌細胞具有明顯的抑制細胞生長的作用。(3)間接免疫熒光法檢測AdhlNG4在人胰腺癌細胞pane1中的表達AdhlNG4處理的Pane1細胞中有外源性ING4蛋白的表達。(4)MTT法檢測AdhlNG4和AdGFP對P

3、ane1細胞生長抑制經(jīng)AdhlNG4處理的pane1細胞生長明顯抑制，并呈現(xiàn)一定的劑量依賴性與時間依賴性。AdING4在50MOI劑量點時，pane1細胞出現(xiàn)較明顯的細胞抑制效應(yīng)，作用72h后，pane1細胞的抑制率為287％。(5)FACS檢測AdhING4對Pane1細胞生長抑制：Ad—hlNG4處理組可見明顯凋亡峰，50MOIAdhING4處理72h的Pane1細胞的凋亡率為242％。結(jié)論AdhING4能在胰腺癌Pane1細胞中成

4、功表達，并可在體外抑制其生長，誘導其凋亡。第二部分持續(xù)低劑量率y射線照射人胰腺癌Pane1細胞的體外實驗研究目的125I粒子持續(xù)低劑量率Y射線體外照射胰腺癌Pane1細胞，研究粒子照射對腫瘤細胞的殺傷機制及其與劑量的關(guān)系，為臨床粒子治療提供依據(jù)。方法自制細胞照射裝置，采用125I粒子持續(xù)低劑量率丫射線照射胰腺癌細胞pane1：(1)照射后用倒置顯微鏡觀察細胞的形態(tài)學變化；(2)克隆形成率檢測細胞增殖的改變；(3)流式細胞儀檢測細胞凋亡的