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1、中圖分類號Q三壘!UDC570碩士學位論文學校代碼!Q三三密級公開c—Abl調節(jié)AIF亞細胞定位的機理研究Thesubcellulardistributionofapoptosis—inducingfactorisregulatedbyc—Ablkinase作者姓名:學科專業(yè):研究方向:學院(系、所):指導教師:副指導教師:凌麗君生物學遺傳學生命科學學院曹誠研究員劉萱副研究員論文答辯日期絲睦上!Z答辯委員會主席中南大學二O一三年五月c—
2、AbI調節(jié)AIF亞細胞定位的機理研究摘要:凋亡誘導因子AIF(apoptosisinducingfactor)由Kroemer等人在1996年發(fā)現(xiàn)并命名。當用caspase廣譜抑制劑zvadfmk處理細胞時,AIF能參與caspase非依賴細胞凋亡途徑,促進細胞凋亡。除了能誘導細胞凋亡外,AIF還對線粒體形態(tài)完整、能量代謝穩(wěn)態(tài)及氧化應激具有重要調控作用。非受體酪氨酸激酶cAbl由人9號染色體的c一動Z基因編碼,屬于Src非受體酪氨酸激酶
3、家族重要成員。在細胞中,c—Abl蛋白能調控多種生命活動,如細胞增殖、細胞粘附、DNA損傷修復、氧化應激及細胞凋亡等。在氧化應激狀態(tài)下,c—Abl可聚集到線粒體上并介導線粒體功能損傷及細胞凋亡。然而,目前cAbl通過線粒體調控胞內氧化應激的分子機制尚未明確。實驗室前期研究表明,非受體酪氨酸激酶cAbl能夠與凋亡誘導因子AIF相互作用??筽—Tyr抗體的WestemBlot實驗表明,cAbl和A唱能使AIF發(fā)生酪氨酸磷酸化。本研究通過一系
4、列細胞免疫熒光染色、免疫沉淀、免疫印跡實驗證明,cAbl特異性抑制劑STl571可誘導AIF亞細胞分布改變,干擾AIF前體進入線粒體,使細胞內線粒體膜電位下降,最終導致ROs(reactiveoxidativespecies)水平升高,線粒體發(fā)生片段化及自噬。該現(xiàn)象能被具有線粒體錨定功能的COXAIF緩解。進一步研究表明,cAbl能使AIF前體發(fā)生酪氨酸磷酸化,且磷酸化位點很可能位于AIF1120aa的線粒體定位信號區(qū)域。同時,我們還發(fā)
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