27369.麻瘋樹葉綠體甘油3磷酸酰基轉移酶基因(jcgpat)的克隆及功能研究

1、Molecularcloningandcharacterizationofplastidlocatedglycerol3phosphateacyltransferase(JcGPAT)fromJatrophacurcasByLingZengSufProfMeiruLuDervlsors：roeiruLi‘AthesissubmittedfortheDegreeofMasterattheGraduateSchooloftheChinese

2、AcademyofSciencesMay2010摘要麻瘋樹葉綠體甘油3磷酸?；D移酶基因JcGPAT的克隆及功能研究摘要低溫是限制冷敏感植物產(chǎn)量和地理分布的重要因素。生物膜受低溫傷害的初始位點。高等植物的耐冷性與類囊體膜的磷脂酰甘油(PG)順式不飽和脂肪酸水平密切相關。由于葉綠體中磷脂酰甘油(PG)的sn2位主要被飽和脂肪酸或反式不飽和脂肪酸所占據(jù)，因而PG在sn1位的順式不飽和脂肪酸水平?jīng)Q定了植物的抗冷性。決定PG中sn1位順式不飽和

3、脂肪酸水平的是葉綠體甘油3磷酸?；D移酶(GPAT：EC23115)對脂肪酰基底物的選擇性。GPAT是PG生物合成過程中的第一個?；福鼘⒅觉；D移到甘油3磷酸的sn1位上合成1酰基Sn甘油3磷酸(溶血磷脂酸)。來源于抗冷性不同的植物的葉綠體(]PAT對底物?；哂胁煌倪x擇性。一般來說，抗冷植物中GPAT優(yōu)先選擇C18：1ACP作為底物，因此在這些植物中PG的sn1位上就含有較高比例的18：1脂肪酸，這些脂肪酸可以在?；舅?/p>

4、去飽和酶的作用下進一步去飽和化成為順式多不飽和脂肪酸；然而在冷敏感植物中，GPAT很難區(qū)分C18：1ACP和C16：0ACP，結果在sn1位會有很高比例的16：0脂肪酸。由于16：0脂肪酸不能被進一步去飽和形成順式不飽和脂肪酸，結果這些植物中PG的sn1位順式不飽和脂肪酸含量較低。本研究從麻瘋樹葉片中分離到葉綠體甘油3磷酸?；D移酶基因，并對該基因的表達和功能進行了分析。主要結果如下：1利用同源序列設計簡并引物，通過RTPCR的方法從麻

5、瘋樹葉片克隆到甘油3磷酸?；D移酶基因的中間片段，通過5RACE和3RACE分別克隆到5’和3’片段，拼接后設計特異引物擴增到全長eDNA，命名為如G腳丁(FJ952147)。JcGPAT的eDNA全長為1516bp，其編碼區(qū)為1389bp，由此推斷GPAT蛋白應包含462個氨基酸，分子量約為5126kDa，推定的蛋白質等電點為701。結構同源性分析表明JcGPAT有四個序列保守的結構域，blockI的組氨酸和天冬氨酸殘基，blockI