豬附紅細胞體抗原分析及間接ELISA檢測方法的建立.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、為了解豬附紅細胞體的抗原特性，本研究建立了三種解離豬附紅細胞體的方法，將解離下的豬附紅細胞體經(jīng)超聲波裂解制備成體抗原，經(jīng)SephadexG-200分離提純后，應用對流免疫電泳(CIEP)定位特異性抗原蛋白峰，再應用十二烷基硫酸鈉—聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)及免疫印跡(Westernblotting)對豬附紅細胞體的粗提及純化的體抗原進行了分析；并且對提取的豬附紅細胞體體外培養(yǎng)液中的分泌抗原進行了分析，與體抗原進行了比較。結果

2、表明，豬附紅細胞體的體抗原有四條蛋白帶，其分子量分別為77kD、62kD、58kD、29kD，其中特異性抗原分子量為58kD和29kD；而分泌抗原僅出現(xiàn)一條蛋白帶，與體抗原中的29kD蛋白帶大小相同，并具有較好的反應原性。說明豬附紅細胞體的體抗原和分泌抗原中均含有反應原性較好的抗原蛋白。 為進一步完善豬附紅細胞體的血清學診斷技術，本研究應用提純抗原建立了檢測豬附紅細胞體抗體的間接ELISA方法。結果表明，抗原濃度為5μg/ml、

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