豬肌肉生長抑制素基因啟動子區(qū)不同單倍型遺傳效應(yīng)的研究.pdf

1、肌肉生長抑制素（myostatin，簡稱抑肌素，又稱GDF8）是骨骼肌發(fā)育的負調(diào)節(jié)因子。在哺乳動物中，myostatin對于控制骨骼肌的量發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。其啟動子區(qū)的多態(tài)有可能影響轉(zhuǎn)錄及生產(chǎn)性能。本試驗用定點突變的方法構(gòu)建了8種單倍型載體，覆蓋豬myostatin基因啟動子區(qū)435、447和879三個多態(tài)位點，通過瞬時轉(zhuǎn)染小鼠的C2C12細胞，在體外水平上分析了myostatin基因啟動子區(qū)不同單倍型對基因表達的影響。以全同胞魯萊

2、黑豬為試驗對象，以GAPDH基因為內(nèi)標，運用qRT-PCR方法，比較了背腰最長肌、半膜肌、半腱肌3種骨骼肌中BC和CC基因型豬myostatin基因mRNA表達量的差別。并分別用qRT-PCR和制作石蠟切片的方法進一步分析了myostatin基因啟動子區(qū)不同單倍型對MyHCs的表達以及肌纖維直徑和密度的影響。通過對myostatin啟動子區(qū)3個SNT的綜合分析，找出對豬肌肉的生長發(fā)育乃至體重的增長具有有利效應(yīng)的單倍型，進而對豬的育種和生

3、產(chǎn)工作做出指導(dǎo)。研究結(jié)果如下：
　　 1.構(gòu)建了8種單倍型載體，其中4種單倍型（對應(yīng)載體為pGL3-A，pGL3-B，pGL3-C和pGL3-D）是已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的單倍型（其中C和D單倍型為本實驗室首次發(fā)現(xiàn)），其它4種為假設(shè)單倍型。
　　 2.體外試驗表明，單倍型A（pGL3-A）啟動報告基因轉(zhuǎn)錄的水平顯著高于其它單倍型（P<0.01）。在4種已經(jīng)鑒定的單倍型中，pGL3-A的轉(zhuǎn)錄活性最高，pGL3-D最低。pGL3-C的活性

4、大于pGL3-B和pGL3-D。體內(nèi)試驗表明，在半腱肌和半膜肌這兩種骨骼肌中，BC型豬myostatinmRNA的表達量低于CC型豬，且在半膜肌中達到顯著水平（P<0.01）。綜合結(jié)果表明，B單倍型對于肌肉的生長具有有利效應(yīng)。
　　 3.除此之外，BC基因型豬骨骼?。òū逞铋L肌、半腱肌和半膜?。┲?種肌球蛋白重鏈坳HyHCⅠ、MyHⅡa、MyHCⅡb和MyHCⅡx mRNA的表達水平都高于CC型。對肌纖維的直徑和密度的分析結(jié)