榿木根瘤內生菌研究及結瘤對宿主生長量的影響.pdf

1、放線菌根瘤植物是自然界中一類重要的固氮資源,作為先鋒樹種和伴生樹種在造林中有重要的應用價值。本研究以取自中國湖南長沙和淚羅的榿木(Alnuscremastogyne Burkill)根瘤為材料,分離得到榿木內生根瘤菌,研究了其生物學特性,并通過回接結瘤研究了內生根瘤菌對榿木生長的影響。主要結論如下:
　　 (1)根瘤內生菌的分離培養(yǎng)以及生理類型和生物學特性測定:采用根瘤切片法和根瘤均漿法分離得到2株榿木根瘤內生放線菌(AC081

2、2T017,AC0812S009),具有相似的菌落形態(tài),在固體培養(yǎng)基上菌落質地堅硬、緊密、乳白色、呈放射狀和凸起狀。在液體培養(yǎng)基上為白色絮狀菌落或分散在底部生長。菌株均具有典型的弗蘭克氏菌菌絲體形態(tài),初步斷定應屬于弗蘭克氏菌的成員。生理類型檢測和生物學特性實驗結果表明,AC0812T017和.AC0812S009的生理類型均為生理B型。最優(yōu)培養(yǎng)條件為:以吐溫-80為碳源,pH值為7.0,溫度30℃。
　　 (2)菌株的固氮酶活性

3、和生長周期:培養(yǎng)時間、培養(yǎng)溫度均會對菌株的固氮活性產生影響。實驗測得 AC0812T017培養(yǎng)36h,培養(yǎng)溫度為25℃時,固氮活性最高。而AC0812S009培養(yǎng)24h,培養(yǎng)溫度為30℃時固氮活性最高。從菌株生長曲線可以看出,在28℃不加氮源的培養(yǎng)條件下,前3d菌株AC0812S009和AC0812T017沒有生長的跡象,從第4d起開始緩慢生長,7-8d后均進入對數生長期,并持續(xù)到20-21d,為穩(wěn)定期,22d后進入衰亡期。
　　

4、 (3)內生菌的回接驗證與影響接種效果的因子:回接試驗的結果證實了AC0812S009和 AC0812T017菌株的確屬于榿木根瘤內生菌,而且菌株相應宿主有很強的侵染能力。接種方法,以切根接種法接種效果最好,不僅根瘤數量多而且苗木生長狀況好；接種量以30-60mg/株為宜；四川榿木選苗高為20cm左右的幼苗作為接種對象為宜。
　　 (4)結瘤對苗木生長的影響:回接試驗結果顯示,經接種處理的苗木顯出較強的生長態(tài)勢,各項生長指標均