金絲桃素新制劑在體外抗AIV的研究.pdf

1、本研究首先采用Klein-Defors懸浮殺滅方法，進(jìn)行金絲桃素新制劑對(duì)低致病力H9N2亞型AIV的殺滅效果實(shí)驗(yàn)。選取1520枚10日齡SPF雞胚，分為金絲桃素新制劑給藥組(760枚雞胚)、利巴韋林對(duì)照組(608枚雞胚)和陽(yáng)性對(duì)照組(152枚雞胚)。根據(jù)藥物濃度的不同，又將金絲桃素新制劑組分為5個(gè)小組，利巴韋林對(duì)照組分為4個(gè)小組。為了觀察不同作用時(shí)間金絲桃素新制劑對(duì)病毒的殺滅效果，再將上述各小組分為兩組，一組是將藥物與病毒的混合液作用1

2、0min后尿囊腔接種雞胚，另一組是將混合液作用30min后尿囊腔接種雞胚。采集尿囊液進(jìn)行血凝試驗(yàn)，并計(jì)算藥物對(duì)這兩種病毒的殺滅率。結(jié)果表明，0.0005mg/ml～0.34mg/ml濃度范圍內(nèi)的金絲桃素新制劑與H9N2亞型低致病力AIV作用30min，對(duì)其殺滅率分別為0，0，93.23﹪，99.99﹪，99.99﹪；作用10min，對(duì)其殺滅率分別為0，0，93.23﹪，99.99﹪，99.99﹪。此結(jié)果顯示，金絲桃素新制劑濃度達(dá)到0.0

3、136mg/ml時(shí)對(duì)低致病力H9N2亞型AIV具有很好的殺滅作用，且作用時(shí)間對(duì)殺滅效果幾乎沒(méi)有影響。 為了確定金絲桃素新制劑對(duì)高致病力AIV是否亦具有很好的殺滅作用，又選用1440枚10日齡SPF雞胚，采用與上述相同的實(shí)驗(yàn)方法、雞胚分組方法及處理情況，進(jìn)行金絲桃素新制劑對(duì)H5N1亞型AIV的殺滅效果實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，0.0005mg/ml～0.34mg/ml濃度范圍的金絲桃素新制劑與H5N1亞型AIV作用10min，對(duì)AIV的殺滅

4、率分別為0，0，94.37﹪，99.99﹪，99.99﹪；作用30min，對(duì)H5N1亞型AIV的殺滅率分別為0，32.39﹪，95.42﹪，99.99﹪，100﹪。此結(jié)果顯示，金絲桃素新制劑對(duì)高致病力H5N1亞型AIV的殺滅作用與濃度和作用時(shí)間均有密切的關(guān)系，即濃度越大、作用時(shí)間越長(zhǎng)，其殺滅作用越強(qiáng)。 為了進(jìn)一步明確金絲桃素新制劑通過(guò)不同給藥方式對(duì)AIV的殺滅效果，本研究選用H5N1亞型高致病力AIV，進(jìn)行體外抗病毒試驗(yàn)。選取1

5、62枚10日齡SPF雞胚，根據(jù)作用方式的不同，平均分為3組(即感染病毒同時(shí)給藥組、給藥后接種病毒組、先感染病毒后給藥組，每組54枚雞胚)，再將每組都設(shè)金絲桃素新制劑組(依據(jù)其濃度不同，將雞胚平均分為5組，每組9枚雞胚)和陽(yáng)性對(duì)照組(9枚雞胚)。通過(guò)測(cè)定雞胚尿囊液的血凝效價(jià)和計(jì)算藥物對(duì)感染雞胚的保護(hù)率，判定金絲桃素新制劑抗H5N1亞型AIV的活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：(1)第一種方式即藥物在體外與病毒作用一段時(shí)間后再將其混合懸液接種雞胚，藥物濃

6、度在0.5mg/ml以上時(shí)，對(duì)感染雞胚的保護(hù)率達(dá)100﹪，同時(shí)藥物組的血凝效價(jià)明顯降低，與對(duì)照組相比差異極顯著(P＜0.01)；(2)第二種方式即在感染病毒前給藥，藥物濃度在2mg/ml以上時(shí)，對(duì)感染雞胚的保護(hù)率達(dá)100﹪，藥物組的血凝效價(jià)明顯降低，與對(duì)照組相比差異極顯著(P＜0.01)；(3)第三種方式即先感染病毒后給藥，藥物濃度在2mg/ml以上時(shí)，對(duì)感染雞胚的保護(hù)率達(dá)88.9﹪，血凝效價(jià)明顯降低，與對(duì)照組相比差異顯著(0.01＜P