用于河南省小麥品種特異性和一致性鑒定的SSR分子標(biāo)記研究.pdf

1、小麥?zhǔn)俏覈?guó)重要的糧食作物之一，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，使得新育成品種的數(shù)量呈快速增長(zhǎng)的趨勢(shì)，每年申請(qǐng)參加國(guó)家或地方審定的小麥新品種多達(dá)上百個(gè)。
　　 新品種必須具備特異性、一致性和穩(wěn)定性（即Distinctness、Uniformity和Stability，簡(jiǎn)稱(chēng)DUS）。目前，中國(guó)及國(guó)際上通行的小麥品種DUS鑒定標(biāo)準(zhǔn)主要是建立農(nóng)藝性狀的基礎(chǔ)上，鑒定結(jié)果容易受環(huán)境因素的影響，而且周期較長(zhǎng)。而基于現(xiàn)代分子標(biāo)記技術(shù)則具有不受季節(jié)限制，簡(jiǎn)便

2、省時(shí)的優(yōu)點(diǎn)。其中SSR（Simple Sequence Repeat簡(jiǎn)單序列重復(fù)）分子標(biāo)記技術(shù)具有高水平的多態(tài)性，技術(shù)簡(jiǎn)便、成本低廉、易于操作、重復(fù)性和穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。本文探討了適于進(jìn)行DUS鑒定的SSR分子標(biāo)記應(yīng)具有的特點(diǎn)，并根據(jù)這些特點(diǎn)篩選出適合用于河南省小麥品種進(jìn)行DUS鑒定的SSR分子標(biāo)記。
　　 本研究以18份河南省親緣關(guān)系較近的小麥品種構(gòu)成A組材料（表2-1），選用252對(duì)SSR標(biāo)記進(jìn)行篩選，分析可用于小麥特異性和一

3、致性鑒定的SSR分子標(biāo)記的特點(diǎn)，對(duì)鑒別力較高的標(biāo)記進(jìn)行穩(wěn)定性分析，確定出可用于河南省小麥品種DUS測(cè)定的骨干引物，并以10份來(lái)源于周麥13和周麥16親緣關(guān)系較近的高代品系構(gòu)成B組材料（表4-1）和41份河南省60年以來(lái)的大面積推廣品種構(gòu)成C組材料(表4-2)，對(duì)骨干引物分辨能力作進(jìn)一步驗(yàn)證。獲得主要研究結(jié)果如下：
　　 1.所選252對(duì)標(biāo)記涉及整個(gè)染色體組，每個(gè)標(biāo)記產(chǎn)生的多態(tài)性變異數(shù)（擴(kuò)增出的條帶數(shù)）存在著很大的差異，最少的有1

4、個(gè)多態(tài)性變異，最多的產(chǎn)生31個(gè)多態(tài)性變異。標(biāo)記之間的鑒別力（Discrimination power，簡(jiǎn)稱(chēng)DP）也有很大的差異，最小的DP值是0（帶型模糊或雜亂），最大的DP值是13。
　　 2.在對(duì)SSR標(biāo)記的相關(guān)性分析中，標(biāo)記的多態(tài)變異數(shù)與DP值存在著極顯著的正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)是0.64;標(biāo)記涉及染色體數(shù)與DP值的相關(guān)性不顯著，相關(guān)系數(shù)是0.15，這說(shuō)明SSR標(biāo)記產(chǎn)生的多態(tài)變異數(shù)對(duì)SSR標(biāo)記的鑒別力有著重要的正向影響。

5、　　 3.根據(jù)SSR標(biāo)記的多態(tài)位點(diǎn)數(shù)與SSR分子標(biāo)記鑒別力之間的相關(guān)性，對(duì)252對(duì)引物進(jìn)行篩選得到6對(duì)標(biāo)記，分別是：Xwmc574、Xwmc500、Xgwm637、Xwmc679、Xwmc388、Xgwm497，產(chǎn)生的多態(tài)性變異數(shù)分別為：9、11、14、6、31、18，而每個(gè)標(biāo)記的鑒別力DP值分別為9、11、10、9、13、13（鑒別的材料數(shù)＞50％）。
　　 4.利用6對(duì)標(biāo)記對(duì)A組材料的一致性分析表明，單個(gè)品種對(duì)單個(gè)標(biāo)記的一

6、致性比率r介于0.667～1.000，單個(gè)品種對(duì)所有標(biāo)記的平均一致性比率介于0.861-0.993，初步確定評(píng)價(jià)品種一致性好壞的指標(biāo)以及分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。評(píng)價(jià)品種一致性高低與單個(gè)品種對(duì)單個(gè)標(biāo)記的一致性比率r以及單個(gè)品種對(duì)所有標(biāo)記的平均一致性比率R有關(guān)，并根據(jù)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，得出品種太學(xué)838、周9823、P9805和周16的一致性最好，屬于一級(jí)一致性；品種淮麥0566、浚麥2號(hào)、許科1018、洛麥23、豫研麥10號(hào)、豫展9914、平麥97108-1、

7、偃師819、豫研麥11號(hào)、鄭麥7449、洛麥21和周麥13的一致性次之，屬于二級(jí)一致性；品種濮02060的一致性稍差，一致性一般，屬于三級(jí)一致性，只有品種國(guó)麥201的一致性最差，屬于四級(jí)一致性。
　　 5.利用B組材料和C組材料對(duì)骨干引物進(jìn)行驗(yàn)證表明，6對(duì)引物在這兩組材料中同樣具有高的DP值，在B組材料（10份材料）中，最小的DP是4，最大的DP是7;在C組材料（41份材料）中，最小的DP值是18，最大的DP是21。并且利用這6