拮抗細(xì)菌L5的鑒定及其生防相關(guān)因子初步分析.pdf

1、生防細(xì)菌L5分離自揚(yáng)州郊區(qū)土壤中，經(jīng)測(cè)定該菌株抑菌譜廣，可抑制番茄灰霉病菌、水稻稻瘟病菌、水稻紋枯病菌、小麥赤霉病菌、油菜菌核病菌和棉花枯萎病菌的生長(zhǎng)，雖然該菌株分離自土壤，但對(duì)氣傳病害番茄灰霉病菌有較強(qiáng)的拮抗作用。通過孢子萌發(fā)抑制實(shí)驗(yàn)、離體葉片和果實(shí)生物測(cè)定，結(jié)果表明菌株L5菌懸液對(duì)孢子萌發(fā)抑制率達(dá)93％，對(duì)番茄葉片灰霉病防效達(dá)72％，是一株具有潛在生防能力的拮抗細(xì)菌。對(duì)該菌株的生防相關(guān)性狀進(jìn)行分析，結(jié)果表明菌株L5可產(chǎn)生抗生素硝吡咯

2、菌素(Pyrrolnitrin)和嗜鐵素等抗菌物質(zhì)，不產(chǎn)生水解酶，蛋白酶。經(jīng)過16SrDNA序列、16S-23SrDNA間區(qū)序列同源性分析和生理生化性狀的測(cè)定，將該菌株鑒定為氣味沙雷氏菌(Serratiaodorifera)。細(xì)菌菌株L5包含2個(gè)16S-23SrDNA的間區(qū)(IGSs)，其中IGS1內(nèi)含tRNAGlu基因，IGS類型屬于IGsG;IGS2內(nèi)含tRNAIle和tRNAAla基因，IGS類型屬于IGSLA。
　　 采

3、用常規(guī)PCR和sitefindingPCR法克隆到沙雷氏菌L5部分硝吡咯菌素合成基因簇(prnABCD)5488bp，將測(cè)得序列在GenBank上進(jìn)行比對(duì)分析，結(jié)果表明與普城沙雷氏菌G3的硝吡咯菌素合成基因簇相似性最高，達(dá)到99％。克隆所得的片段包含完整的prnA、prnB、prnC基因和部分prnD基因，序列已經(jīng)遞交到GenBank，登錄號(hào)為JQ712667。這四個(gè)開放閱讀框都位于同一個(gè)轉(zhuǎn)錄單元內(nèi)，轉(zhuǎn)錄方向從prnA—prnD。prn

4、A全長(zhǎng)1598bp，起始密碼子ATG，終止密碼子TAG;prnB基因全長(zhǎng)1086bp，與prnA基因終止子直接相連，起始密碼子GTG，終止密碼子TGA;prnC基因全長(zhǎng)1704bp，與prnB基因間隔41bp，起始密碼子ATG，終止密碼子TAG,比對(duì)發(fā)現(xiàn)prnC部分在各個(gè)菌株中相似性最高，保守型最強(qiáng);prnD基因長(zhǎng)1022bp，與prnC基因間隔24bp，起始密碼子ATG，不包括完整開放閱讀框。目前氣味沙雷氏菌硝吡咯菌素合成基因簇為國(guó)際