異三聚體G蛋白在生長素介導的擬南芥?zhèn)雀l(fā)育中的作用機理研究.pdf

1、揚州大學博士學位論文異三聚體G蛋白在生長素介導的擬南芥?zhèn)雀l(fā)育中的作用機理研究姓名：吳曉霞申請學位級別：博士專業(yè)：作物遺傳育種學指導教師：梁建生20080601II揚州大學博士學位論文結果表明，GPAl主要定位在根尖頂端及中柱部位，而AGBl在整個根部均有分布。G朋J『過表達植株的側根發(fā)生數(shù)目較野生型顯著增加，彳G艿過表達植株的側根發(fā)生數(shù)與野生型相比無顯著性差異。結合G蛋白突變體根系發(fā)育特征，根據G蛋白信號轉導模式，推測AGBl在側根發(fā)

2、育過程中具有負調節(jié)作用。對種子萌發(fā)4d內過表達株系及野生型的側根發(fā)育時期分布規(guī)律分析表明，在萌發(fā)第4d時么GBJ過表達幼苗的側根原基主要分布于第34期，G以J過表達幼苗的側根原基總數(shù)高于Col野生型，其增加的側根原基主要集中在第35期，說明G以J『過表達有利于促進側根原基的早期形成及分裂過程。6不同基因型懸浮培養(yǎng)細胞對2，4D和NAA的響應存在顯著的差異。用2pM2，4一D／NAA處理懸浮培養(yǎng)細胞系，昭6J『。2和G以』過表達懸浮細胞對

3、2，4D促進的細胞分裂不敏感，對NAA誘導的細胞伸長過程超敏感。ImPCR結果表明，在無外源生長素處理條件下，昭6J2懸浮細胞中細胞分裂周期素基因爿fCKD4jJ的表達量相對較高。NAA處理促進了口96J2和G剛J過表達懸浮細胞中與細胞伸長相關的么召尸J的表達。根據2，4D和NAA進出細胞機制的不同，可以推測么GB『突變體及G以J過表達細胞系具有較強的生長素極性輸出能力。7對不同基因型的根系向重性反應研究表明：突變體昭6J『2和過表達G

4、剛J植株對向重性刺激的反應顯著強于Col和即口J3，而過表達AGBl植株的向重性反應顯著低于Col。8RealtimePCR研究結果表明，口96J2及G以』過表達植株根部生長素極性輸出載體P刪的表達量顯著增加。根據以上研究結果，認為G蛋白突變體的側根發(fā)生差異是由于影響了根部生長素的向基運輸途徑，彳GB』對這一過程具有負調節(jié)作用。彳GBJ突變促進了根系中生長素極性輸出載體PINl轉錄水平的表達，從而負調節(jié)根系中生長素的向基極性輸出途徑，促